1RNA的生物合成—转录.pptVIP

第十一章 RNA的生物合成——转录 * * RNA的生物合成包括 RNA转录 —生物体以DNA为模板合成RNA的过程 称为转录或基因转录。 RNA复制 —某些RNA病毒传递遗传信息的方式 第一节 RNA转录体系 DNA模板 四种NTP RNA聚合酶 某些蛋白因子 必要的无机离子 一、DNA是RNA转录的模板 （一）转录是不对称的 * 不是细胞内DNA全长都转录 * 转录时 一条DNA链起转录生成 ，称模板链(template strand)，或称有意义链 与其互补的DNA链无转录活性称编码链(coding strand)，或称反意义链。 编码链与RNA的序列完全相同，只是T换成U DNA双链中包含许多基因，而各基因的模板链不全在同一条链上，这种现象称为不对称转录。即： （1）DNA双链中一条转录时，另一条链不 被转录； （2）模板链并非永远在同一条链上。 5’ 5’ 3’ 3’ （二）可转录的DNA一个区段为一个转录单位 5’ 3’ 转录单位 调节组件 结构基因 启动子 调节基因 操纵基因 可转录出RNA的区段 启动子(promotor)： 是转录起始点之前的一段核苷酸序列，是RNA 聚合酶识别和结合的部位，又称启动基因。 * 原核生物启动子： -35区 -10区 +1 转录方向 终止位点 3’ 5’ * 真核生物启动子： 核心启动子：TATA盒、起始子(initiator) 近侧序列元件：GC盒、CAAT盒、OCT盒等 RNA 二、RNA聚合酶是转录的主要酶 RNA聚合酶即DNA指导的RNA聚合酶 ( DNA directed RNA polymerase, DDRP) 模板：单链DNA 原料：4种NTP 产物：RNA （一）RNA转录的化学反应 NTP (NMP)n + ppi RNA聚合酶 （二）RNA聚合酶具有多种功能 * 5’→3’聚合活性 * 解旋解链酶的活性 使核苷酸通过磷酸二酯键依次聚合 将模板DNA链解开一小段（≤20个碱基对） --缺乏3’?5’外切酶活性，无校读功能 全酶：五个亚基（?2??’?）组成 ?2??’ 称为核心酶 参与RNA链的延长 ?亚基称为起始因子 辨认启动子，协助转录起始 （三）原核生物的RNA聚合酶 参与核心酶的组装 抗结核菌药利福霉素可抑制原核生物转录： 与?亚基非共价结合，阻止第一个NTP的进入 结合底物并催化形成磷酸二酯键 催化活 性中心 （hnRNA) 、snRNA RNA聚合酶I、II、III （四）真核生物的RNA聚合酶 第二节 RNA转录的基本过程 三个阶段： 起始 延长 终止 以原核生物为例： 一、链的起始 ? 因子辨认启动子并与核心酶结合为全酶 识别转录起始点 RNA聚合酶将DNA局部解链17bp， * 起始点，RNA聚合酶催化2个NTP按碱基 配对原则以氢键结合于DNA模板，生成 第1个磷酸二酯键 * 通常转录开始即5’端是pppA或pppG * RNA聚合酶全酶-DNA-pppGpN-OH-3’ 称为转录起始复合物 * 转录起始不需要引物 * 转录开始后，? 因子脱落并可反复利用 由核心酶催化 RNA链延长方向5′? 3′ 二、链的延长 核心酶 三、链的终止 原核生物转录终止方式： 1、不依赖?因子的终止 富含CG的发夹结构 (terminaor) 终点的寡聚U * 六聚体，50kD，有依赖RNA的ATP酶活性， 是一种RNA-DNA解旋酶。 * 识别新生RNA链上的终止信号，使RNA-DNA 双螺旋解开，释放RNA，并和RNA聚合酶一 起脱落。 2、依赖?因子的终止 ?因子（终止因子，termination factor）