Y染色体微缺失与男性不育的相关性研究.docVIP

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2019-05-13 发布于安徽
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Y染色体微缺失与男性不育的相关性研究.doc

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目次目次引言1 第1 章基于QF-PCR 的Y 染色体微缺失检测体系的建立3 材料与仪器3 仪器3 样本选取4 实验方法4 样本DNA 提取4 PCR 扩增5 PCR 产物检测5 分析软件的使用与数据分析7 引物复合体系的建立8 实际扩增体系设计与调试13 拓展体系建立15 结果16 讨论19 结论19 参考文献19 第2 章临床样本检测与相关性研究22 临床样本检测22 临床样本选取22 样本DNA 提取22 扩增与检测22 数据分析与结果23 常见异常类型的判定23 性染色体异常的检测与验证25 AZF 典型缺失和AZFc 部分缺失的类型与发生率26 AZFc 定量分析27 讨论29 - III - 万方数据河北联合大学硕士学位论文结论 30 参考文献 30 第 3 章综述 33 Y 染色体微缺失与男性不育 33 Y 染色体无精子因子区域与精子发生 33 Y 染色体的结构 33 AZF 的发现与定位 33 AZF 各区及相关基因 34 AZFa 34 AZFb 35 AZFc 36 Y 染色体微缺失类型 36 典型缺失 37 部分缺失 37 AZFc 复制 38 Y 染色体微缺失检测的临床意义 39 Y 染色体微缺失检测技术 40 参考文献 42 附录 A 常见异常类型结果示例 46 致谢 56 导师简介 57 作者简介 58 学位论文数据集 59 - IV - 万方数据英文缩略表英文缩略表英文缩写英文全称中文全称 AID Artificial Insemination Donor 供精人工授精 AZF Azoospermia Factor 无精子因子 DAZ Deleted in Azoospermia DAZ 基因 EAA European Academy Andrology 欧洲男科学研究学会 EMQN European Molecular Genetics Quality Network 欧洲分子遗传学质控网 FAM Carboxy-fluorescein 5-羧基荧光素（蓝色荧光标记） FISH Fluorescence in Situ Hybridization 荧光原位杂交 HEX Hexachloro-fluorescein 六氯-6-甲基荧光素（绿色荧光） ICSI Intracytoplasmic Sperm Injection 卵细胞胞浆内单精子注射 PAR Pseudoautosomal region 拟常染色体区 PESA percutaneous epididymalsperm aspiration 经皮穿刺附睾抽吸取精术 PGD Preimplantation Genetic Diagnosis 植入前基因诊断 QF-PCR quantitative fluorescent PCR 定量荧光 PCR ROX Carboxy-x-rhodamine 羧基-X-罗丹明（红色荧光标记） SRY Sex Determining Region 性别决定区 STR Short Tandem Repeat 短串联重复序列 STS Sequence Tagged Site 序列标签位点 TAMER Tetramethyl-carboxyrhodamine 4-甲基-6-羧基-罗丹明（黄色荧光） TESA Testieular spermaspiration 睾丸精子穿刺 WHO World Health Organization 世界卫生组织 - V - 万方数据河北联合大学硕士学位论文插图或附表清单图 1 Microread ROX-500 分子量内标电泳结果图 2 位点分布图图 3 NTC 对照检测示意图图 4 女性模板对照图 5 正常男性模板图 6 AZFa 区缺失检测结果图 7 AZFc 区缺失检测结果图 8 AZFbc 区缺失检测结果图 9 AZFabc 区缺失检测结果图 10 AZFc 区 gr / gr 缺失检测结果图 11 AZFc 区 g1 / g3 缺失检测结果图 12 AZFc 区 b1 / b3 缺失检测结果图 13 AZFc 区复制检测结果图 14 克氏综合症检测结果图 15 超雄综合症检测结果图 16 样本分布散点图图 17 Y 染色体结构示意图图 18 Y 染色体 AZFc 区重组示意图表 1 主要仪器列表表 2 PCR 扩增成分表 3 PCR 缓冲液组分表 4 位点区域分布表表 5 30 重 QF-PCR 引物序列表 6 引物最终配比表 7 缺失类型与对应位点表 8 结果统计表表 9 CDY1