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正交设计法研究人参皂苷的最佳提取工艺
【摘要】 目的 研究 人参皂苷最佳提取工艺。 方法 正交设计法,以溶媒用量、乙醇浓度、回流时间、回流次数为因素,每个因素3个水平,人参皂苷含量为评价指标。结果 不同条件,人参皂苷含量不一样。结论 取人参粗粉,加10倍量75%乙醇,回流提取5次,每次30min。 【关键词】 正交设计;人参皂苷;提取工艺 人参为舒脉宁注射液中的贵重药,人参皂苷提取量直接 影响 注射液的疗效。因此为制备舒脉宁注射液而提取人参皂苷, 参考 有关资料,用正交设计法研究其最佳提取工艺。 1 实验材料 人参 符合《 中国 药典》。 人参皂苷Rb1 化学对照品,中国药品生物制品检定所提供,批号703-8802。 高效液相色谱仪 HP8810美国惠普公司。 正交设计 .1 因素水平的确定 根据人参皂苷的性质,确定用乙醇回流法提取, 自然 pH值条件下,本研究重点考察乙醇浓度、乙醇用量、回流时间、回流次数等4个因素,每个因素3个水平,因素水平表见表1。表1 人参皂苷提取因素-水平表 .2 正交表的选择 本研究选择L9表,正交设计及统计 分析 见表2。 实验方法 .1 样品液的提取 取人参20g,加表2中规定量的规定浓度的乙醇,回流规定的次数和时间,放置24h以上,滤过,回收乙醇,加水溶解并稀释至100ml,115℃灭菌30min,静置3天以上,滤过,备用。 .2 含量测定 参照《中国药典》XX版新增与修订 内容 汇编“人参”项下方法进行。精密样品液1ml,置50ml量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。分别取对照品溶液与供试品溶液20μl,注入高效液相色谱仪,测定, 计算 ,即得。 结果 测定结果见表2。 表2 提取工艺正交表及统计分析表 结果分析 实验结果表明,影响人参皂苷提取的因素大小顺序为BCAD,即乙醇浓度为最重要的因素,溶媒用量、提取次数及提取时间影响不大。各因素最佳水平为A2B1C1D3。 结论 最佳提取工艺:取人参粗粉,加10倍量75%乙醇,回流提取5次,每次30min。 讨论 (1)人参为五加科植物人参Panax ginseng 的干燥根。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津安神作用。用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病赢虚、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克。人参皂苷为人参的主要成分,含量约为4%。人参皂苷的提取 方法 较多。有用甲醇提取,除去甲醇后用水溶解,乙醚脱脂,正丁醇提取,得总皂苷[1]。用95%乙醚回流提取,回收乙醇,加水溶解,石油醚等脱脂,正丁醇提取[2]。用80%甲醇室温提取,回收甲醇,乙醚脱脂,正丁醇提取[3]。对于人参制剂提取工艺,有 文献 报道,将人参分别进行50%乙醇回流、50%乙醇渗漉及水煎煮3种提取液用正丁醇萃取,丙酮沉淀,沉淀干燥后用甲醇溶解过滤,结果热回流比较好[4]。有人选用乙醇浓度、回流次数、回流时间、pH值的 影响个因素,以比色法测定人参总皂苷含量,结果认为用85%乙醇回流7次,每次回流60min,pH值在原 自然 状态,以此条件提取人参皂苷为最佳方案[5]。本 研究 是 参考 各家报道, 应用 正交设计法研究其最佳工艺。 (2)本研究设计的依据为人参皂苷的性质,人参皂苷易溶于水、甲醇、乙醇,可溶于正丁醇、醋酸、醋酸乙酯。其次根据前人研究的结果。 (3)本研究中,参照 中国 药典方法,应用高效液相色谱法测定人参皂苷的含量。其方法学考虑将在其他论文中报告,本文不作赘述。 【参考文献】 1 李伯廷.植物药有效成分的提取与分离.太原:山西高校联合出版社,1993,262. 陆蕴如.中药化学.北京:学苑出版社,1995,303-304. 王继彦.吉林农业大学学报,1993,15(1):25-30. 刘健明,宋安全.人参地上部分总苷 工业 化提取工艺的研究.中国中药杂志,1992,:291. 姜岚.人参类注射液中人参总皂苷的提取工艺研究.中药通报,1988,
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