《免 疫 学 实 验》 原 理 考 核 复 习 题
叙述抗血清的制备、鉴定、纯化和保存的基本原理与步骤
制备:
用具有抗原性的物质注入健康动物机体后,将引起免疫应答,并会形成浆细胞,分泌抗体。抗体主要存在于血清中,经一定次数注射,使血清中的抗体组达到要求浓度,然后采集动物血液,再从血液中分离出血清,从而获得抗血清。
鉴定:
抗体特异性的鉴定:双向免疫扩散法
抗体效价的鉴定:凝集试验 、双向免疫扩散试验、ELISA
抗体纯度的鉴定:SDS、双向免疫扩散试验、免疫电泳
抗体亲合力的鉴定:平衡透析法、ELISA、RIA竞争结合试验
纯化:
盐析法:硫酸铵盐析法、硫酸钠盐析法
凝胶过滤法:常结合盐析法
离子交换层析法:DEAE纤维素、QAE-sephadex、QAE纤维素
亲和层析法:纯化抗原或SPA交联Sepharose 4B制成亲和层析柱
保存:
2℃~8℃保存:短期保存
冰冻保存:保存5年
真空干燥保存:保存5~10年
叙述淋巴细胞分离的基本原理与方法
原理:外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同,红细胞和多核白细胞密度较大,在1.090左右,而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090,血小板为1.030~1.035.为此利用一种密度介于1.075~1.092之间而近似于等渗的溶液做密度梯度离心、。
叙述固相酶联免疫吸附检测
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