虎眼万年青和刺五加多糖的提取工艺研究_硕士毕业论文.doc

虎眼万年青和刺五加多糖的提取工艺研究 PAGE 虎眼万年青和刺五加多糖的提取工艺研究 目 录 TOC \o 1-3 \h \z \u 第1章 前言 1 1.1多糖 1 1.1.1多糖概述 1 1.1.2多糖提取 1 1.1.3多糖分离 4 1.1.5多糖纯度及相对分子质量的测定 5 1.1.6多糖结构分析 6 1.1.7多糖生物活性 6 1.2本课题立题背景、研究意义及主要研究内容 9 1.2.1立题背景、研究意义 9 1.2.2研究内容 10 第2章 虎眼万年青和刺五加多糖的提取工艺研究 12 2.1实验材料 12 2.1.1原料 12 2.1.2试剂 12 2.1.3仪器 12 2.2实验方法 12 2.2.1多糖含量测定方法 12 2.2.2虎眼万年青多糖提取工艺考察 14 2.2.3刺五加多糖提取工艺考察 15 2.3结果与讨论 15 2.3.1虎眼万年青多糖提取工艺 15 2.3.2刺五加多糖提取工艺 26 2.4小结 34 第3章虎眼万年青和刺五加多糖的分离纯化及理化性质分析 36 3.1实验材料 36 3.1.1原料 36 3.1.2试剂 36 3.1.3仪器 36 3.2实验方法 37 3.2.1虎眼万年青和刺五加多糖分离纯化工艺流程 37 3.2.2分级沉淀 37 3.2.3除蛋白质 38 3.2.4脱色 38 3.2.5透析 38 3.2.6离子交换柱层析 39 3.2.7凝胶过滤柱层析 39 3.2.8纯度鉴定 40 3.2.9一般物理性质分析 41 3.2.10多糖及糖醛酸含量测定 41 3.2.11分子量测定 42 3.3结果与讨论 42 3.3.1分级醇沉结果 42 3.3.2DEAE Sepharose Fast Flow柱层析分离结果 43 3.3.3 Sephadex G-75柱层析结果 45 3.3.4纯度鉴定结果 45 3.3.5一般物理性质分析结果 46 3.3.6多糖及糖醛酸含量测定 46 3.3.7分子量测定结果分析 47 3.4小结 47 第4章 虎眼万年青和刺五加多糖的结构初步分析 48 4.1原料、仪器与试剂 48 4.1.1供试材料 48 4.1.2仪器 48 4.1.3试剂 48 4.2实验方法 48 4.2.1红外光谱分析 48 4.2.2单糖组成分析 49 4.3结果与讨论 50 4.3.1红外光谱分析 50 4.3.2 GC-MS测定单糖组成结果 51 4.3.3毛细管电泳测定单糖组成结果 52 4.4小结 54 第5章 虎眼万年青和刺五加多糖活性研究 55 5.1仪器及药品 55 5.2实验方法 55 5.2.1总抗氧化活性测定 55 5.2.2对羟基自由基的清除作用 56 5.2.3对O2-抑制作用 56 5.2.4对有机自由基DPPH的清除作用 56 5.2.5对脾细胞增殖的影响 57 5.3结果与讨论 58 5.3.1多糖总抗氧化活性测定结果 58 5.3.2对羟基自由基的清除作用测定结果 59 5.3.3对O2-抑制作用测定结果 61 5.3.4多糖对有机自由基DPPH·的清除作用结果 62 5.3.5多糖对脾细胞增殖影响测定结果 63 5.4小结 65 参考文献 66 致谢 72 攻读学位期间研究成果 73 中文 摘要 I 英文摘要 III 长春师范学院硕士学位论文 PAGE 71 第1章 前言 1.1多糖 1.1.1多糖概述 多糖又称多聚糖，是由多个单糖基及糖苷键相连接而形成的高聚物，一般是由20个以上的单糖聚合而成，广泛存在于动物细胞膜、高等 植物和微生物的细胞壁中，是构成生命的四大基本物质之一，与维持生命活动密切相关。蛋白质、核酸和多糖是重要的生物大分子，由于多糖的结构难以控制，再加上人们早期只是把多糖看作细胞结构成分和食物来源，使得人们对多糖的研究成为“生物化学中最后一个前言”。目前，以多糖结构、功能和药用价值为核心的糖工程被认为是继蛋白质工程、基因工程之后生物化学和分子生物学领域中最后一个巨大的科学前沿[1-4]。 至今，几百种天然多糖的发现已给人类提供了丰富的生物多聚体的宝库。多糖不但是动植物的主要结构支持物质（如甲壳动物中的几丁质、植物中的纤