拉曼除谱法在水溶液体系中的应用-化学物理专业毕业论文.docxVIP

摘要摘要 摘要 摘要 自发拉曼光谱经常被用于研究溶液中的分子结构。蛋白质分子内部由于氢 键的相互作用，存在着它们特殊的空间构象。蛋白质的空间构象决定了它们的 功能，这就使得对它tf]二-级结构的研究显得至关重要。蛋白质只有在水溶液环 境中才能表现出生物活性。作为了解蛋白质的空间构象的关键光谱指针，酰胺 A谱带常与水分子的O-H伸缩振动光谱相重合，数据分析极为困难。为了解决 这类难题，本论文主要由两部分工作组成。在第一项项工作中，我们提出了一 种新的光谱数据分析方法一一拉曼除谱法，采用它可以发现很多平时无法得到 的光谱信息。比如放大用以区分和提取蛋白质水溶液中的酰胺A谱带信号结构 以及研究溶菌酶水溶液的热变性过程。第二项工作则是采用拉曼除谱法研究丙 酮水溶液的微观非均匀混溶现象。具体研究内容如下： (1)拉曼除谱法的数学模拟。模拟的蛋白质溶液光谱由模拟的纯水光谱与 一个很弱的高斯线型谱峰加和而成，谱带信息无法被直接读出。在模拟拉曼除 谱中可以观察到一个独立的谱峰。这个谱峰与之前模拟的酰胺A谱带谱峰几乎 相同。无论是拉曼位移还是半高全宽，都和之前的模拟谱峰相吻合。拉曼除谱 法在整个0．H键波数段的普遍适用性也被验证。 (2)拉曼除谱法研究溶菌酶和静糜蛋白酶的酰胺A谱带结构。本工作中 我们选取了溶茵酶和具有与其二级结构组成比例具有明显差异的0【．糜蛋白酶这 两种试剂。伽螺旋结构在酰胺I和酰胺A的波数范围中，分别落在比B．折叠更 低和更高的波数段上。在水溶液酰胺I的谱峰位置对比中，溶菌酶波数更低， 这是它具有更多的成．螺旋造成的，这一关系与它们的固体样品的拉曼光谱一致。 在酰胺A波数段的拉曼除谱中，具有更多a．螺旋结构的溶菌酶其水溶液的谱峰， 比具有更多p一折叠结构的a一糜蛋白酶水溶液的谱峰位于更高波数的位置。这 一关系也与它们的固体样品的拉曼光谱一致。不难得出结论，它们的在这一波 数段的谱峰信息被拉曼除谱法放大。 (3)拉曼除谱法研究溶菌酶水溶液的热变性过程。从600C到840C，在酰 胺A谱带振动波数段内的溶菌酶水溶液拉曼除谱被测得，这些温度下的振动频 率与温度的关系被s型曲线函数拟合。由拟合结果得出的溶菌酶在水溶液中的 热变性温度为大约750C。这里我们得到的溶菌酶在水溶液中的热变性温度与前 万方数据 摘要人工作中得到的热变性温度是互相吻合的。这些结果证明拉曼除谱法可以用于 摘要 人工作中得到的热变性温度是互相吻合的。这些结果证明拉曼除谱法可以用于 直接观测蛋白质水溶液的酰胺A谱带信息。 (4)通过拉曼除谱的分析方法，观测丙酮水溶液的微观结构。丙酮是酮中 结构最简单的，是实验室中常见的有机物，是常用溶剂，宏观上与水任意比例 互溶。然而在分子层面上，丙酮与水实际上是否理想混合，是人们一直在讨论 的问题。我们采用拉曼除谱法对它们的不同浓度溶液进行了分析。为了更方便 研究丙酮．水体系中0．H段的拉曼光谱，具有与丙酮相似物理性质的全氘代丙酮 被用来替代丙酮，与水配成溶液，拉曼除谱法帮 液中提取出与丙酮 的结合水的拉曼光谱。获得结合水的光谱后，通 的方式将所测得的 谱峰进行归属，进而分析出他们的空间结构。丙酮与水的非均匀混合现象被观 测到，另外C．H O的氢键也在论证中。 关键词：拉曼除谱法，原位测量，蛋白质，酰胺A谱带，热变性，丙酮，非均 匀混合 II 万方数据 AbstractAbstract Abstract Abstract Raman spectroscopy is often used to study the structure of molecules in solution． Because of the intermolecular hydrogen bands，proteins have their special structures Since the function of protein is decided by the structure，it is important to study the secondary structure．Protein only shows biological activity in aqueous solution．As key to analyze the secondary structure of protein，amide A band overlaps with the 0一 H stretching of water seriously．To solve the problem，this paper consists of two parts of study．In the I st study，we presented a new analytical