12基因工程的基本操作程序(二)资料.pptVIP

复习回顾 复习回顾 1、基因工程的基本操作程序的四个步骤是？核心是？ 2、目的基因指的是什么基因？ 3、获取目的基因常用的三种方法是？其中人工合成法又包括哪两种? 4、基因文库包括哪两类？它们有什么区别？ 5、PCR的原理是？PCR扩增过程中的解旋方式是？PCR需要的条件有？ 7、基因表达载体的构建的目的是？ 8、一个基因表达载体的组成包括哪几部分？ 9、标记基因的作用是？ 10、启动子，终止子的位置，作用？起始密码子，终止密码子呢？ （一）、检测 1、检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 (关键步骤) ①首先取出转基因生物的基因组DNA ②用含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记,以此做探针 ③使探针和转基因生物的基因组杂交,若显示出杂交带,表明基因已插入染色体DNA中 （1）方法: DNA分子杂交 （2）过程: 知识延伸——DNA分子杂交技术 该方法是根据碱基互补配对原则，把互补的双链DNA解开，把单股的DNA小片段用同位素、荧光分子或化学发光催化剂等进行标记，之后同被检测的DNA中的同源互补序列杂交，从而检出所要查明的DNA或基因。 归纳步骤 （二）、鉴定（个体生物学水平） 2、检测目的基因是否转录出了mRNA 3、检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 ①方法: 分 子 杂 交 方法: 抗原-抗体杂交 ②过程: