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质谱在蛋白质中的应用;; ; 质谱分析蛋白优点:
1. 可用于分析大分子。
2.可用于分析不纯化合物。因为生物体系相对较复杂,物 质提纯不易,因此新型质谱的出现使一些研究成为可能。
3.样品消耗量很低。
4.仪器操作简便,检测速度快,适用于大批量的样品研究。; ;电喷雾电离(ESI-MS);基质辅助激光诱导解吸质谱(MALDI-MS); 优点;
质谱在蛋白质研究中的主要作用在于检测确定相应蛋白质的归属,其中测定小肽及蛋白质序列是确定蛋白质的根本。
质谱用于肽和蛋白质的序列测定方法有3种。主要如下:; 第一种方法叫蛋白图谱(protein mapping),用特异性的酶解或化学水解的方法将蛋白切成小的片段,然后用质谱检测各产物肽分子质量,将所得到的肽谱数据输入数据库,搜索与之相对应的已知蛋白,从而获取待测蛋白序列.
第二种方法是利用待测分子在电离及飞行过程中产生的亚稳离子,通过分析相邻同种类型峰的质量差,识别相应的氨基酸残基.
第三种方法与Edman法有相似之处,即用化学探针或酶解使蛋白质或肽从N端或C端逐一降解下氨基酸残基,形成相互间差一个氨基酸残基的系列肽,名为梯状测序(Ladding sequencing),经质谱检测,由相邻峰的质量差知道相应氨基酸残基。;质谱中常见氨基酸残基的元素组成和质量数;质谱质谱中氨基酸残基的元素组成和精确质量数中常见氨基酸残基的元素组成和质量数;质谱在蛋白质研究??的其他应用;蛋白质的定量;
1.质谱研究磷酰化氨基酸及磷酰化小肽
2.抗HIV前药与蛋白的非共价键复合物的ESI-MS研究
3.二肽类似物在质谱中的重排反应及其机制的研究等等。;《生物有机质谱》赵玉芬
《蛋白质组学研究的新分析技术及其应用》陈执中;End!
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