林荫银莲花多倍体种质培育和离体快繁研究-特种植物育种与栽培专业论文.docxVIP

华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 如需保密，解密时间 年 月 日 是否保密 五 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果．尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已 经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位 或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定．与我一同工作的同志对本研究 所做的任何贡献均巴在论文中做了明确的说明，并表示了谢意． 研究生签名： 玉f铼对 时间： z-t1年二月l多 日 学位论文使用授权书 注：保密学位论文(印涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的 学位论文作者签名：刍l橡对导辩签名：／物． 签名日期：弘l；年占月侈甚 签名日期：伽l f年‘月，弓日 林荫银莲花多倍体种质培育和离体快繁研究目录 林荫银莲花多倍体种质培育和离体快繁研究 目录 目勇乏 ．i 摘要 ．．I Abstract III 缩略语表： ∥ V 1前言 1 1．1林荫银莲花研究概况 l 1．1．1林荫银莲花植物学特征及分布 ．1 1．1．2林荫银莲花的药用价值 。l 1．1．3林荫银莲花的繁殖 ．2 1．2药用植物育种 2 1．2．1药用植物育种的特点 ．2 1．2．2药用植物的育种方法 ．．3 1．3药用植物多倍体育种 ．4 1．3．1药用植物多倍体的生物学特性变化 ．4 1．3．2诱导植物多倍体的途径与方法 ．5 1．3．3药用植物多倍体的鉴定方法 ．7 1．3．4药用植物多倍体育种展望 ．8 1．4组织与细胞培养在药用植物中的应用 9 1．4．1体细胞突变体的产生、筛选和应用 ．9 1．4．2在育种上的应用 lO 1．4．3离体培养技术应用 11 1．5离体叶培养 ．12 2研究的内容、目的和意义 14 2．1研究方案、技术路线 ： ．．14 2．1．1研究方案 14 2．1．2技术路线 - ．15 3林荫银莲花多倍体的诱导 16 3．1试验材料及培养 。16 3．1．1材料 ．．16 3．1．2无菌芽的培养 ．．16 3．2试验方法 17 3．2．1试验设计 1 7 3．2．2试剂的配制 ．17 3．2．3根茎点滴法处理 17 3．2．4无菌芽点滴法处理 ．18 3．2．5无菌芽浸泡法处理 18 华中农业大学201 华中农业大学201 I届硕士研究生学位论文 3．2．6多倍体的扩繁、生根和移栽 18 3．2．7多倍体的鉴定 19 3．2．8统计方法 ．．19 3．3结果与分析 。20 3．3．1根茎点滴法处理诱导 ．20 3．3．2无菌芽点滴法诱导试验 ．22 3．3．3无菌芽浸泡法处理试验 ．22 3．4讨论 ．23 3．4．1多倍体诱导方法的选择 。23 3．4．2秋水仙素诱导多倍体的处理浓度和时间 24 3．4．3多倍体嵌合体与纯化 24 3．5小结 ．25 3．6展望 ．25 4林荫银莲花叶片离体快繁 26 4．1试验材料 26 4．2试验方法 26 4．2．1实验设计 26 4．2．2培养方法 ．26 4．2．3统计方法 ．27 4．3结果与分析 27 4．3．1 NAA和6-BA对叶片诱导的影响 ．27 4．3．2 2，耷-D和6-BA对叶片诱导的影响 29 4．3．3 NAA、2。4_D和6．BA对叶片分化的影响 3 l 4．3．4不同培养条件对生根的影响 33 4．4讨论 ．． 34 4．4．1离体快繁中外植体的污染问题 34 4．4．2植物生长调节剂对叶片外植体再生芽诱导的影响 34 4．4．3再生途径的探讨 35 4．4．4培养条件对再生芽诱导的影响 35 4．5结论 ．．36 4．6展望 一37 5全文总结 ．．38 参考文献： ．．39 致谢 46 附l ．z17 附：! ．5zI 林荫银莲花多倍体种质培育和离体快繁研究摘要 林荫银莲花多倍体种质培育和离体快繁研究 摘要 林荫银莲花(Anemoneflaecida Fr．Schmidt)属银莲花属(Anemone)，以其干燥 根茎入药，俗称地乌，具有祛风湿、助筋骨、消肿止痛等功效，开发意义巨大。在 自然条件下林荫银莲花生长期短，生物量小，种子发芽困难，野生资源有限，急需 实现人工栽培。本研究针对其种质资源缺乏的问题，以无菌苗叶片为外植体建立了 离体叶的再生体系，并初步探讨了多倍体种质培育的方法。主要研究结果如下： (1)以根茎上萌发的芽为材料，用不同浓度秋水仙素(colchicine)作为诱导剂， 采用棉球包裹处理，然后栽培到土壤中观察形态结构变化。结果表明，以O．2％浓度 秋水仙素处理根茎萌发芽8d的诱导率最高，达81．67％，且死亡率低，是诱导多倍 体材料的可行方法。