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酶的竞争性抑制实验报告 　　实验十六:丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用　　【实验名称】：丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用　　09救援一班第三大组李岚宇XX　　室温：25℃　　实验目的：1、学习和掌握竞争性抑制作用的特点。　　2、观察丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。　　实验原理：化学结构与酶作用的底物结构相似的物质，可与底物竞争结合酶的活性中心，使酶的活性降低甚至丧失，这种抑制作用称为竞争性抑制作用。琥珀酸脱氢酶是机体内参与三羧酸循环的一种重要的脱氢酶，其辅基为FAD，如心肌中的琥珀酸脱氢酶在缺氧的情况下，可使琥珀酸脱氢生成延胡索酸，脱下之氢可将蓝色的甲烯蓝还原成无色的甲烯白。这样，便可以显示琥珀酸脱氢酶的作用。　　丙二酸的化学结构与琥珀酸相似，它能与琥珀酸竞争而和琥珀酸脱氢酶结合。若琥珀酸脱氢酶已与丙二酸结合，则不能再催化琥珀酸脱氢，这种现象称为竞争性抑制。如相对地增加琥珀酸的浓度，则可减轻丙二酸的抑制作用。实验材料与仪器：　　1器材大白鼠、手术剪、镊子、磁盘、匀浆器、量筒、烧杯、纱布、滤纸、试管及试管架、恒温水箱、电热水浴锅　　2试剂/L琥珀酸溶液、/L琥珀酸溶液、/L丙二酸溶液、/L丙二酸溶液、1/15mol/L磷酸缓冲液、％甲烯蓝、液体石蜡。　　实验步骤:　　1、酶提取液的制备：去大白鼠的肝脏、心脏、肾脏，用冷水洗3次，加入1/15mol/L磷酸缓冲液pH在。在匀浆器中进行匀浆，然后用纱布过滤，用干净的烧杯收集过滤的备用。2、取试管6支，编号，在按图步骤操作，　　各管溶液立即混均匀，沿试管壁加入液体石蜡，约，各管置于37℃的水浴中保温，切勿摇动试管，随时观察比较各试管颜色的变化，记录褪色时间。　　实验结果记录：　　表1实验讨论：　　1、酶提取液中有琥珀酸脱氢酶活性，表1所示，在试管1中没有抑制剂，但琥珀酸依然能脱氢，使得甲烯蓝反应得甲烯白。　　2、各管的褪色有明显的时间差别，褪色时间随[I]/[S]逐渐增大，而增大(转载于:写论文网:酶的竞争性抑制实验报告)。　　3、丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型是竞争性抑制，其特点：最大反应速率Vmax不变，米氏常数Km增大，竞争性抑制可以通过增大底物浓度来减轻抑制程度。4、本实验中5号、6号试管的作用是做对照，5号试管和1号试管做对照，说明酶提取液中有琥珀酸脱氢酶的存在，6号试管中的酶提取液在100℃的水浴加热煮沸过，所以琥珀酸脱氢酶是失活的。　　【注意事项】：　　1、酶提取液的制备应操作迅速，以防止酶活性降低。　　2、加入液体石蜡的作用是隔绝空气，以避免空气中的氧气对实验造成影响，因此加石蜡时试管壁要倾斜，注意不要产生气泡。3、37℃水浴保温过程中，不能摇动试管，避免空气中的氧气接触反应溶液，使得还原型的甲烯白重新氧化成蓝色。　　4.、37℃水浴保温过程中，要注意随时观察各试管的褪色情况。5、实验结果结束后，一定要洗干净试管内的液体石蜡。XX年10月9号　　说明：本实验由四个小实验组成，其中第一个实验必　　做，其他三个小实验选做　　写实验报告时，可以只写需要做的实验内容！　　实验四酶的特性实验　　一、实验目的　　酶是生物催化剂，生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。二、实验内容　　本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响4个小实验组成。酶的专一性1、实验原理　　本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例，来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜，能氧化具还原性的糖，生成砖红色沉淀氧化亚铜。　　2、材料、仪器与试剂　　(1)材料：新鲜配制的唾液及其稀释液(2)仪器：恒温水浴；沸水浴；试管及试管架；　　(3)试剂：2%蔗糖溶液；溶于%NaCl的%淀粉溶液；班氏试剂。3、实验操作稀释唾液的制备①唾液的获取　　用一次性杯取一定量的饮用水，漱口以清洁口腔，然后在嘴中含10-20ml饮用水，轻漱2min左右时间，即可获得唾液的原液，内含唾液淀粉酶。②不同稀释度唾液的制备　　本实验需制备1：1、1：5、1：20、1：50、1：200等五个不同浓度的稀释唾液。　　举例说明：1:5指的是稀释了5倍的唾液，制备方法为1份原液+4份蒸馏水。　　1：20指的是稀释了20倍的唾液，制备方法为1份1：5的稀释液+3分蒸馏水。唾液淀粉酶最佳稀释度的确定　　表1唾液淀粉酶稀释度的确定　　淀粉酶的专一性