发酵的过程控制.ppt

1发酵终点的判断 * 提高总产率，必须缩短发酵周期，即产率下降时放罐。（最大产率） 过早，残留过多的养分，增加提取工艺。 过晚，菌体自溶，延长过滤时间，还使不稳定的产物浓度下降。 * 2菌体自溶的监测 微生物因养分的缺失或处于不利的生长环境下，其自身开始裂解的过程称为自溶。 * 3影响自溶的因素 菌种原因 遗传因素 菌龄 * 计算机在发酵过程控制中的应用 参数巡回采集和综合处理 程序控制 直接数字控制 优化控制或自适应控制 * 本章小结 掌握代谢调控在发酵过程控制中的应用 了解发酵过程中需检测的参数类型，了解基本的参数检 测方法 掌握温度、pH、溶解氧、CO2和呼吸商、基质浓度等对 发酵的影响及其控制 掌握发酵过程补料控制的意义、原则和方法 了解高密度发酵及过程控制 了解泡沫对发酵的影响及其控制 了解计算机自动控制技术在发酵过程控制中的应用 * （七）基质浓度对发酵过程的影响及补料控制 1. 基质浓度对发酵的影响 2. 补料控制 * 1. 基质浓度对发酵的影响 （1） 基质浓度对微生物生长的影响 s<<KS情况下，比生长速率与基质浓度呈直线关系： 一般情况下符合Monod方程式 基质浓度高时 * * (2) 基质浓度对产物合成的影响 低浓度限制 低水平诱导 高浓度抑制及分解阻遏作用 e.g.葡萄糖氧化酶发酵：葡萄糖用量从8%降至6%，补入2%氨基乙酸或甘油，使酶活力分别提高26%或6.7%。 谷氨酸发酵（乙醇为碳源）：当乙醇浓度为2.5g/L和35g/L时，可延长谷氨酸生产时间，但在更高浓度下，菌体生长受到抑制，谷氨酸产量降低。 * 2. 补料控制（1）补料的目的 解除基质过浓的抑制 解除产物的反馈抑制 解除分解代谢物阻遏作用 避免因一次性投糖过多造成细胞大量生长，耗氧过多而造成波谷现象。 在生产上，补料还经常作为纠正异常发酵的一个重要手段。 * （2）补料的内容 补充微生物能源和碳源 补充菌体所需要的氮源 补充微量元素或无机盐 添加前体、诱导剂等 * （3）补料的原则 中间补料的数量为基础料的1～3倍 。 补料的原则就在于控制微生物的中间代谢，使之向着有利于产物积累的方向发展。 现有的各种补料措施都是通过实验方法确定的。 * 大多数补料分批发酵均补加生长限制性基质 以经验数据或预测数据控制流加； 用传感器直接测定限制性基质的浓度，直接控制流加； 以溶氧、pH、RQ、排气中CO2分压及代谢物质浓度等参数间接控制流加； 以物料平衡方程，通过传感器在线测定的一些参数计算限制性基质的浓度，间接控制流加。 （4）补料控制的策略 * （5）反馈控制参数的确定 为了有效地进行中间补料，必须选择恰当的反馈控制参数，以及了解这些参数与微生物代谢、菌体生长、基质利用以及产物形成之间的关系。 * （6）补料速率的确定 优化补料速率是补料控制中十分重要的一环，补料速率要根据微生物对营养等的消耗速率及所设定的培养液中最低维持浓度而定。 补糖速率最佳点与设备的供氧能力有关。 e.g.青霉素发酵：KLa大的设备补料速率相应大些；供氧低的设备，补料速率相应减少，产量比供氧能力好的设备降低23％。 * （7）实例：四环素发酵中的补糖控制 补糖时间对四环素发酵单位的影响 Ⅰ－补糖时间适当 （ 45h后加） Ⅱ－补糖时间过晚 （62h开始加） Ⅲ －补糖时间过早 （20h后加） * （八）高密度发酵及过程控制 1. 高密度发酵 2.高密度发酵策略 3.高密度发酵技术 4.高密度发酵存在的问题 * 1. 高密度发酵 代谢产物的合成是靠菌体作为生产者来完成的。 高细胞密度发酵就是为了适应这一要求而得到广泛的重视。 高密度发酵：在发酵过程中保持较高的细胞密度，同时细胞或菌体的生产能力保持在较佳的状态。 * 高细胞密度发酵成功的实例 菌种 特征 基础培养基 发酵罐类型 培养方法 细胞干重（g/L） 培养时间（h） 产率 (g/L)/d 大肠杆菌 需氧、葡萄糖过量、形成乙醇 葡萄糖矿物盐或甘油矿物盐 搅拌罐 葡萄糖（甘油）非限制指数补料 140～150 30～40 90～100 枯草杆菌 嗜温菌 含葡萄糖的完全培养基 搅拌罐 补料分批培养，以葡萄糖调节pH 185 30 160 毕氏酵母 嗜温菌 葡萄糖矿物盐 搅拌罐 补料分批培养，补甲醇 100 50～120 120～150 酿酒酵母 嗜温菌 含葡萄糖的完全培养基 搅拌罐 连续培养，流加葡萄糖 210 80 50～150 * 2.高密度发酵策略 使用最低合成培养基以便进行准确的培养基设计和计算生