微生物工程(中国药科大学生物工程所有课件)-公开课件(设计).pptVIP

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(一)分批培养 指在发酵过程中,除了不断进行通气(好氧发酵)和为调节发酵液的 pH 而加入酸碱溶液外,与外界没有其它物料交换的一种发酵方式。培养基的量一次性加入,产品一次性收获,是目前广泛采用的一种发酵方式。 根据投料方式的不同可分为分批培养、补料分批培养、半连续培养和连续培养。 分批培养中微生物的生长 迟滞期 对数生长期 稳 定 期 死亡期 优点 操作简单,周期短,染菌机会少,生产过程和产品质量容易掌握 缺点 产率低,不适于测定动力学数据 (二)连续培养 指 连续不断地向反应器(发酵罐)中流加新鲜发酵液,同时又连续不断地排出发酵液,从而使 pH 、养分、溶解氧等保持恒定,使微生物的生长和代谢活动保持旺盛稳定状态的一种发酵方式 。 单罐连续发酵 优点 高效,产品质量较稳定,节约能源。 缺点 菌种不稳定的话,长期连续培养会引起菌种退化,降低产量。长时间补料染菌机会大大增加。 ? (三)补料分批培养 是指在微生物分批发酵过程中,以某种方式向发酵系统中补加一定物料,但并不连续地向外放出发酵液的发酵技术,是介于分批发酵和连续发酵之间的一种发酵技术。 (四)半连续培养 在补料分批培养的基础上间歇放掉部分发酵液称为半连续培养。 五、发酵过程的控制 (一)物理参数 压力 温度 料液 流量 搅拌 转速 黏度 空气 流量 浊度 搅拌 功率 物理 参数 温度 温度对发酵的影响: 1、温度影响反应速率 2、温度影响发酵方向 最适温度的选择: 1、根据菌种及生长阶段选择 2、根据培养条件选择 3、根据菌生长情况 (二)化学参数 基质浓度 溶解氧浓度 氧化还原电位 产物的浓度 废气中的氧浓度 化学参数 pH值 废弃中的CO2浓度 pH值 发酵过程pH变化的原因 (1)基质代谢 糖代谢、氮代谢 、生理酸碱性物质利用后pH会上升或下降 (2)产物形成 (3)菌体自溶,pH上升,发酵后期,pH上升 pH对发酵的影响 (1)pH影响酶的活性 (2)pH值影响微生物细胞膜所带电荷的改变 (3)pH值影响培养基某些成分和中间代谢物的解离,从而影响微生物对这些物质的利用 (4)pH影响代谢方向 pH的控制 (1)调节好基础料的pH (2)在基础料中加入维持pH的物质 (3)通过补料调节pH (4)当补料与调pH发生矛盾时,加酸碱调pH (5)不同调pH方法的影响 (6)发酵的不同阶段采取不同的pH值 基质浓度 基质就是发酵液中的各种营养物质,基质浓度指发酵液中糖、氮、磷等重要营养物质的浓度 3、工业上常用的糖类 ① 葡萄糖 所有的微生物都能利用葡萄糖 但是会引起葡萄糖效应 工业上常用淀粉水解糖,但是糖液必须达到一定的质 量指标 ② 糖蜜 是制糖工业的副产物。 主要含有蔗糖,总糖可达50%~75% 注意:糖蜜含有较多的杂质,有些需要进行预处理。 ② 淀粉、糊精 使用条件:微生物必须能分泌水解淀粉、糊精的酶类 缺点:难利用、 发酵液比较稠。 优点:来源广泛、价格底 难利用,可以解除葡萄糖效应 (二)氮源 氮源主要用于构成菌体细胞物质,常用的氮源可分为两大类:有机氮源和无机氮源。 1、有机氮源 成分复杂:除提供氮源外,有些有机氮源还提供大量的无机 盐及生长因子。 例 玉米浆: ①可溶性蛋白、生长因子(生物素)、苯乙酸 ②较多的乳酸 ③硫、磷、微量元素等 种类:氨盐、硝酸盐和氨水 特点:微生物对它们的吸收快,所以也称之谓迅速利用的氮源。但无机氮源的迅速利用常会引起pH的变化如: (NH4)2SO4 → 2NH3 + 2H2SO4 NaNO3 + 4H2 → NH3 + 2H2O + NaOH 生理酸性物质;生理碱性物质 2、无机氮源 选择合适的无机氮源有两层意义: 满足菌体生长 稳定和调节发酵过程中的pH 氮源使用的一些相关问题: 有机氮源和无机氮源应当混合使用 早期:容易利用易同化的氮源—无机氮源 中期:菌体的代谢酶系已形成、则利用蛋白质 有些产物会受氮源的诱导和阻遏 有机氮源选取时也要考虑微生物的同化能力 开发效果好、有针对性的有机氮源仍然是令人感兴趣 的课题 (三)无机盐和微量元素 1、作用:各种不一样 2、来源:C、N源,以盐的形式补充 3、用量:根据具体的产品,以实验决定

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