扇贝裙边GAG对碱性成纤维细胞生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响-药理学专业论文.docxVIP

论文第一篇 论文 第一篇 论文 扇贝裙边GAG对碱性成纤维细胞生长因子诱导的血管 平滑肌细胞增殖的影响 研究生 初向华 指导教师 刘 赛教授 青岛大学医学院药理学教研室 田家自然科学壮{；；=、 山东省自然科学基金(Y2001C05)资助课题 !墨塑茎 !墨塑茎 一一—— 扇贝裙边GAG对碱性成纤维细胞生长因子诱导的血管平滑肌细胞 增殖的影响 硕士研究生 初向华 导 师 刘赛 教授 中文摘要 目的：研究栉孔扇贝裙边糖胺聚糖(SS．GAG)对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC) 增殖的抑制作用，并探讨SS—GAG抗动脉粥样硬化(AS)的作用机理。 方法：1．体外培养血管平滑肌细胞，建立由碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导 的VSMC增殖模型，运用MTT比色分析法研究SS—GAG对VSMC增殖活性的影响。 2．采用bFGF诱导的VSMC增殖模型，通过黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸显色法 等多种生化的方法观察SS—GAG对VSMC增殖过程中的超氧化物歧化酶(SOD)、 丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH．PX)和总抗氧化能力(T-AOC)的影 响。 3．应用bFGF诱导的VSMC增殖模型，用硝酸还原酶法等化学的方法观察SS．GAG 对vSMc增殖过程中细胞内总一氧化氮合酶(Nos)活力和一氧化氮(NO)含量 的影响。 4．采用透射电镜观察SS—GAG对bFGF诱导增殖的VSMC超微结构的影响。 5．运用流式细胞仪检测SS—GAG对增殖的VSMC的细胞增殖动力学的影响。 6．采用原位杂交的方法，观察SS—GAG对bFGF诱导增殖的VSMC内的血小板源性 生长因子(PDGF)A链mRNA表达的影响。 结果：1．与模型组比较．SS—GAG(501．tg／ml、1001．tg／ml和20099／m1)可降低bFGF所 诱导的VSMC的增殖活性(P0．05，P0．01)，以100p．g／ml抑制作用最强。 2．与模型组相比。SS—GAG(509tg／ml、100pg／ml和200pg／m1)可傻bFGF诱导增{}i!{ 的VSMC的脂质过氧化物一丙二醛(MDA)产生减少(P0．05，P0．01)；SS．GAG (1001．tg／ml和2001．tg／m1)可使bFGF诱导增殖的VSMC的谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH．PX)活力和总抗氧化能力(T—AOC)升高(P0．05)。 固家自然科学肇金(3017Il 57)、 3 山东甫O然科学桀会(Y20BIC(15)资助谍题 中文摘要3．与模型组相比，SS—GAG(100／．tg／ml和200pg／m1)可使bFGF所诱导增殖的VSMC 中文摘要 3．与模型组相比，SS—GAG(100／．tg／ml和200pg／m1)可使bFGF所诱导增殖的VSMC 内的总NOS活力升高(P0．05，P0．01)；而100}Lg／ml的SS-GAG还可使bFGF所 诱导增殖的VSMC的NO释放量明显增加(P0，01)。 4．透射电镜显示，SS．GAG(100pg／m1)作用后血管平滑肌细胞内肌丝较模型组增多， 而粗面内质网和高尔基复合体等细胞器明显少于模型组，表明SS—GAG可明显抑制 VSMC由收缩表型向合成表型转化。 5．与模型组比较，SS—GAG(5099／ml、10099／ml和200pg／m1)可使bl：GF所诱导增 殖的VSMC中处于s期的细胞明显减少(P0．01)。 6原位杂交结果显示，bFGF所诱导增殖的VSMC经SS．GAG(10099／ml和20099，m1) 作用后，细胞内PDGF—A链mRNA表达较模型组减少(P0．05，P0．01)，阳性细 胞数量也较模型组减少。 结论：SS—GAG可降低bFGF所诱导的VSMC的增殖活性，减少MDA的生成，使 GSH—PX活力增加，而且细胞的总抗氧化能力也升高；同时细胞内的总NOS活力和 NO的分泌量均增加。表明SS—GAG的抗动脉粥样硬化作用可能与其减少脂质过氧 化物产生、增强抗氧化系统的活性、提高细胞内总NOS活力和增加NO释放有关。 SS—GAG还可通过抑制VSMC由收缩表型向合成表型转化、抑制细胞内DNA合成、 减少S期细胞和减少细胞内PDGF-A链基因的转录，从而抑制VSMC增殖，达到抗 动脉粥样硬化的效果。 关键词栉孔扇贝裙边糖胺聚糖动脉粥样硬化碱性成纤维细胞生长因子血管平 滑肌细胞增殖 田家自然科学基金(30I 7It 57)、 山东省自然科学基金(Y2001C05)资助课题 茎茎塑里一—一Effects 茎茎塑里一—一 Effects of Glycosaminoglycan from Scallop Skirt on the Proliferation of Vascular Smooth Muscl