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巴斯德;;一.培养基;牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。;一、培养基的成分:;(3).不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 (参考教材附录内容);(1)按培养基的物理形态分:
液体培养基
半固体培养基
固体培养基;二、无菌技术;消毒
使用较为温和的物理或化学方法,杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。;①煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min。
②巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或 80℃下煮15min。
③化学药剂消毒法:用75%酒精等进行皮肤消毒;氯气消毒水源。
④紫外线消毒。;①灼烧灭菌
②干热灭菌:160-170 ℃下加热1-2h。
③高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15-30min.;;思考:1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?;练习;变形题;(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基; 3.溶化:;?;思考4;倒???板:;1).培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?;3).平板冷凝后,为什么要将平板倒置?;四、纯化大肠杆菌;;将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环_______; 思考:1、为什么在操作的第一步要灼烧接种环?;思考:3、在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?
;平板划线法的要点;固体培养基:菌落;将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中 ; 思考: 1、涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作?;五.结果分析与评价 ;大肠杆菌的纯化培养分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段;实验分为实验组(接种大肠杆菌的培养基)和对照组(未接种大肠杆菌的培养基)。;六.菌种的保藏:
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