硫代吡喃糖苷的合成及QCM研究其与ConA的相互作用分析-高分子化学与物理专业论文.docx

万方数据 万方数据 A Thesis Submitted in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master of Science Synthesis of Thio-Containing Pyranosides and Their Binding Affinity Analysis to Con A by QCM Candidate : Wu Bin Major : Polymer Chemistry Physics Supervisor : Prof. Dong hai Huazhong University of Science and Technology Wuhan, Hubei 430074, P. R. China Jan, 2014 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作 及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做 出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声 明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即： 学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许 论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部 分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段 保存和汇编本学位论文。 保 密□，在 年解密后适用本授权书。 本论文属于  不保密□。 （请在以上方框内打“√”） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 华中科技 大学硕士学位论 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 摘 要 糖和蛋白的相互作用在生命活动中起着至关重要的作用，所以研究并深入了解这 种作用一直都是糖生物学研究的核心课题。为此，一方面必须设法获得大量不同结构 的糖分子作为研究对象，如糖化学合成就为高效获得结构单一的糖分子提供了重要手 段；另一方面，便捷、高效、可靠的糖和蛋白相互作用的测试手段也必须被建立起来， 如目前广为应用的糖微阵列、表面等离子共振（SPR）、等温滴定量热法（ITC）、 石英晶体微天平（QCM）方法等。 硫糖在寡糖的合成中有着重要的应用，许多硫糖本身可以直接用来作为药物，另 外，巯基容易发生多种可逆反应也使得硫糖在动态组合化学的研究中具有独特优势， 因此硫糖的合成以及它们与蛋白的相互作用一直受到人们的关注。本论文的研究目的 主要是合成单硫代及二硫代的吡喃糖苷，特别是合成多种硫代甘露糖苷，然后用 QCM 方法研究它们与刀豆蛋白凝集素（Con A）之间的相互作用。 在合成硫代吡喃糖苷的过程中，我们主要研究和发展了双转型合成硫代糖苷的方 法。我们首先将各种甲基吡喃糖苷用四丁基醋酸铵催化的方法一步获得 3,6 位乙酰化 的糖苷，接着将其 2,4 位羟基转化为三氟甲基磺酸酯，再用硫代乙酸盐对其 2,4 位进 行同步转型或分步连续转型得到相应的含单硫乙酰基或双硫乙酰基的产物，最后脱掉 乙酰基，即得到单硫代及二硫代的吡喃糖苷。基于上述方法和其他硫糖合成方法，我 们最后高效合成了 9 种单硫代或者双硫代的甘露糖苷。 我们进一步用 QCM 测试方法，通过与固化在 QCM 芯片表面的甘露糖苷的竞争 结合实验，对比了这 9 种硫代甘露糖苷与 ConA 的相对结合能力，测得了他们的半抑 制浓度 EC50 值。 实验结果表明：甲基α-D-甘露糖苷的 2 位羟基被巯基取代后，与 Con A 的相互作用大大增强了，甲基 2-硫代-α-D-甘露糖苷的 EC50 值仅为甲基α-D-甘露糖苷 的四分之一；4 位或者 6 位的羟基被巯基取代后或者端基的构型发生改变，与 Con A 的相互作用都有非常显著的下降。3 位羟基被巯基取代后，与 Con A 的相互作用能力 下降相对较少。 关键词： 硫代糖苷合成 硫代甘露糖苷 石英晶体微天平（QCM） 刀豆蛋白凝集 素（Con A） I II万方数据 II 万方数据 Abstract Carbohydrate/protein interactions are crucially important in many biological processes, and thus have been greatly concerned. To investigate those interactions, both various carbohydrate targets mainly supplied by