解链曲线:在连续加热DNA的过程中以温度对A260值作图,所得的曲线称为解链曲线。 Tm:紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度,又称融解温度(melting temperature, Tm)。其大小与G+C含量成正比。 三、DNA的复性与分子杂交 DNA复性(renaturation)的定义 在适当条件下,变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。 减色效应 DNA复性时,其溶液OD260降低。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这一过程称为退火(annealing) 。 热变性的DNA在复性过程中,具有碱基序列部分互补的不同的DNA之间或DNA与RNA之间形成杂化双链的现象。 核酸分子杂交 (hybridization): 变性 复性 复性 核酸分子杂交的应用 研究DNA分子中某一种基因的位置 定两种核酸分子间的序列相似性 检测某些专一序列在待检样品中存在与否 是基因芯片技术的基础 第五节 核 酸 酶 核酸酶是指所有可以水解核酸的酶 依据底物不同分类 DNA酶(deoxyribonuclease, DNase) RNA酶 (ribonuclease, RNase) 依据切割部位不同分类 核酸内切酶: 限制性核酸内切酶 非特异性核酸内切酶 核酸外切酶: 5′
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