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- 2019-05-24 发布于江苏
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实验七土壤中细菌的分离纯化及计数 一、实验目的 1、掌握微生物分离纯化的方法及步骤。 2、掌握平板菌落计数的原则和方法。 二、实验原理 平板菌落计数法根据微生物在固体培养基上所形成的菌落一般由一个细胞繁殖而成的原理进行。即一长成的菌落代表一个活的细胞。计数时先将待测样品作一系列稀释,使其中的微生物充分分散成单个细胞,再吸取一定量的稀释菌液接种到培养皿中,使其均匀分布于平皿中的培养基内,经培养单个细胞繁殖形成菌落,统计菌落数目即可计换算出样品的含菌数。 环境中不同种类的微生物通常混杂生活在一起,为了获得纯种微生物,一般根据该微生物营养或培养特点,制作或设置一些选择性培养基,或选择性培养条件,再用稀释涂布平板法或稀释混合平板法或划线法分离,纯化该微生物,直至得到该纯种菌株。 1、牛肉膏蛋白胨培养基、土壤样品、无菌水 2、培养皿、玻璃试管、胶头滴管、涂布棒 三、实验材料 四、实验步骤 1、细菌的分离纯化——稀释涂布平板法 (1)试管和培养皿编号 在试管壁上依次标上10-2、 10-3、10-4、10-5、10-6。在培养皿养皿的底部依次标上10-4-1、 10-4-2 、 10-5-1 10-5-2 、10-6-1、 10-6-2。 (2)倒平板 将牛肉膏蛋白胨固体培养基融化(微波炉加热3min-5min),待培养基冷却至不烫手时(约50℃),无菌倒入已
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