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[最新考纲] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用 1.无菌操作技术包括消毒和灭菌。消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒和紫外线消毒等;灭菌包括灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。 2.培养基的制备包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板等步骤,倒置平板的目的是防止培养皿盖上的水滴滴入培养基造成污染。 3.大肠杆菌的纯化包括平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法要求多次划线,稀释涂布平板法要求菌液要充分地稀释。 4.微生物的计数要求制作多个平板,且选择能长出30~300个菌落的平板进行计数。 5.尿素分解菌和纤维素分解菌的分离都运用了选择培养基,前者所用的培养基中尿素是唯一的氮源,后者所用的培养基中纤维素是唯一的碳源。 [课前导学] 1.培养基的概念:人们按照微生物对____________的不同需求,配制出供其生长繁殖的____________。 2.方法与步骤 【答案】固体 氮源 无机盐 称量 灭菌 温和 强烈 所有 芽孢 平板划线 稀释涂布平板 3.无菌技术的方法、类型和对象[连一连] 【答案】①②⑥—b—Ⅰ、Ⅱ ③④⑤—a—Ⅲ、Ⅳ 4.大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基过程:计算→______→溶化→灭菌→倒平板。 (2)纯化大肠杆菌的原理:在培养基上将细菌稀释或分散成_____________,形成单个菌落,此菌落是由一个细胞繁殖而来的子细胞群体。 (3)微生物的常用接种方法:____________和稀释涂布平板法,接种过程仍然是__________操作。 【答案】B 【解析】分析表中成分可知,该培养基中没有凝固剂,为液体培养基,该培养基的营养成分齐全,但存在伊红、美蓝等鉴别物质,属于鉴别培养基,A错误;该培养基中的蛋白胨既是唯一的氮源,也是碳源,而葡萄糖是绝大多数生物最常利用的碳源,B正确;该培养基中存在的无机盐和蛋白胨中的某些物质可以看作是生长因子,C错误;培养基调节完pH还要进行灭菌等操作后才能使用,D错误。 2.下列有关微生物培养的叙述中,不正确的是( ) A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 B.单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法 C.培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌 D.倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落 【答案】C 【解析】微生物培养中获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染,通常可以采用稀释涂布平板法和平板划线法进行单菌落的分离,以消除污染杂菌;培养基都需要灭菌,但要根据实际情况选择灭菌的方法,如果培养基的营养物质在高温条件下易分解,则不能使用高压蒸汽灭菌法;倒平板后需将培养皿倒置,以防止培养基蒸气冷凝成的水滴入培养基而污染。 [课前导学] 1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 3.分解纤维素的微生物的分离 【答案】复合 纤维二糖 刚果红 透明圈 刚果红 纤维素 梯度 透明圈 [小题通关] 1.某学者欲从被石油污染过的土壤中分离出能分解石油的细菌,并从中筛选出分解石油能力较强的菌株,基本操作过程为采集菌种→选择培养→纯种分离→性能测定。下列叙述错误的是( ) A.应选用以石油为唯一碳源的选择培养基 B.可通过多次选择培养的方式来达到分离和纯化目的菌的目的 C.单菌落周围分解圈小的菌株的降解能力强 D.接种后需将平板倒置且需一个未接种的培养基作对照 【答案】C 【解析】降解石油能力越强的菌株,在菌落周围形成的分解圈越大。 2.使用液体选择培养基培养纤维素分解菌的目的是( ) ①用液体选择培养基可获得大量纤维素分解菌 ②用液体培养基便于稀释涂布平板 ③纤维素分解菌只能在液体培养基中生长 ④用液体培养基可鉴别纤维素分解菌 A.①② B.①③ C.②④ D.③④ 【答案】A 【解析】使用液体选择培养基培养纤维素分解菌,一方面可以获得大量纤维素分解菌,另一方面便于稀释涂布平板。纤维素分解菌也可以在固体培养基上生长;鉴别纤维素分解菌使用的是固体培养基。 1.培养基中的营养成分:培养基一般都含有水、无机盐、碳源、氮源和生长因子,此外,还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 2.培养基的种类及应用 3.微生物的纯化培养 消毒和灭菌的比较 1.回答下列有关微生物培养的问题: (1)如表是某培养液成分含量表,该培养液培养的微生物的同化作用类型是________;若用此培养液培养固氮微生物,则应除去的成分是______________,应加入的物质是________________。 ④培养基配制好后,分装前应进行的工作是________________________。 ⑤从配制培养基直到培养完成,所采用的预防杂菌污染的方法是__________、_________
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