第五章 真核生物基因表达调控.ppt

第五章 真核生物基因表达的调控 真核生物基因表达的特点： 1．基因组DNA存在的形式与原核生物不同； 2．真核生物中转录和翻译分别在细胞的细胞核与细胞质中进行； 3．真核基因表达的调控可以在多个水平上进行：DNA水平的调控、转录水平调控、转录后水平调控、翻译水平调控、蛋白质加工水平的调控； 4．不同组织和细胞类型合成不同的一套蛋白质，即具有细胞特异性或组织特异性； 5．真核生物基因调控的信号分子； 6．持家基因和时态基因。 第一节 真核细胞的基因结构 一、真核细胞与原核细胞在基因表达与DNA空间结构上的差异：P238； 二、基因家族 1、简单多基因家族； 2、复杂多基因家族； 三、真核基因的断裂结构——断裂基因 外显子与内含子（定义、可变性、连接区）； 四、真核生物DNA水平的调控； 基因家族 1、定义：P239 2、类型：P239 （1）、简单多基因家族： rRNA基因（rDNA）形成串联重复序列：参见书P240 ； （2）、复杂多基因家族：组蛋白基因家族，P241； （3）、发育调控的复杂多基因家族：血红蛋白基因家族 三、真核基因的断裂结构 1、外显子与内含子：定义 2、外显子与内含子的可变性——同一段DNA序列生成了两条或两条以上的mRNA链； 3、外显子与内含子的连接区——特点:1）内含子两端序列不能互补；2）连接区序列高度保守（GT-AG法则）； 有些DNA序列可编码一条以上的蛋白质 外显子与内含子的可变性——不同外显子的使用产生不同蛋白质 外显子与内含子的连接区： 四、真核生物DNA水平的调控 1、染色质结构对转录的影响 2、基因丢失—马蛔虫； 3、基因扩增—rDNA； 4、基因重排与变换—小鼠免疫球蛋白、人类血红蛋白； 1、染色质结构对转录的影响 转录发生之前，染色质常常在特定的区域被解旋或松弛，形成自由DNA并发生DNA局部结构的变化，导致结构基因暴露，促进转录因子与启动区DNA的结合，从而使基因转录。 HMG蛋白与启动子的结合，导致单链区形成，使启动子暴露，产生了DNaseⅠ超敏感位点。 基因扩增：P247 定义： 实例：非洲爪蟾卵母细胞中的rRNA基因(rDNA) 基因重排与变换 基因重排的定义：P248 实例：小鼠免疫球蛋白、人类血红蛋白； DNA甲基化与基因活性的调控 DNA甲基化能关闭某些基因的活性，去甲基化则诱导了基因的重新活化与表达。其机理是DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与DNA的相互作用，抑制了转录因子与启动区DNA 的结合效率。 DNA的甲基化能提高该位点的突变频率，因而可作为诱变剂或致癌因子调节基因表达。 X染色体上DNA的高度甲基化可引起X染色体的失活。 第二节 顺式作用元件与基因调控 真核生物的转录调控主要通过顺式作用元件与反式作用因子的相互作用来实现； 一、启动子及其对转录的影响； 二、增强子及其对转录的影响； 一、启动子（Ⅱ型）及其对转录的影响 1、真核基因的结构及其功能 基因的定义：P255； 原核和真核基因转录起始位点上游区结构（起始位点与调控区域）的比较： 3端的poly（A）位点与其上游的AATAAA区； 2、真核生物启动子的多元性 1）真核基因启动子的结构：P255： TAAT区：精确起始转录； CAAT区和GC区：控制转录起始频率。 2）真核基因启动子的多元性：并不是每个基因的启动子区都包含这三个UPE； 3）真核基因启动子的UPE对转录起始的决定性作用可能是各个UPE之间的距离，而不是序列本身。 真核基因启动子的多元性 RNA pol Ⅰ的启动子 RNA pol Ⅰ负责5.8S、18S、28SrRNA的合成 RNA pol Ⅰ的启动子由核心启动子及上游调控元件（UCE）构成。核心启动子能够启动转录，其活性被UCE增强。 所需转录辅助因子为UBF1和SL1 RNA pol Ⅰ启动子起始转录复合物的形成 RNA pol Ⅲ的启动子 RNA pol Ⅲ主要负责tRNA和5SrRNA的合成； RNA聚合酶Ⅲ的启动子有两类，5SrRNA和tRNA基因的启动子在起始位点的下游，即在基因的内部，称为内部启动子，这是很特殊的。另一类启动子在起始位点上游，如snRNA（核内小RNA）基因的启动子。 所需转录因子为TFⅢA、TFⅢB、TFⅢC。 RNA pol Ⅲ启动子与转录起始因子起始转录 3、增强子及其对转录的影响：P257 定义：增强子 增强子的性质； 第三节 反式作用因子（转录因子）对转录的影响 一、转录因子的类型； 二、转录因子的DNA结合结构域； 一、转录因子的类型 1、具有普遍性作用的通用转录因子 一般作用于类型Ⅱ基因的基本核心启动子元件，如TATA框和转录