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第三章 血液分析仪检验;重点 : 血液分析仪测定的原理、方法
; 血液分析仪功能:①全血细胞计数功能。
②白细胞分类功能。③扩展功能。;§2 检测原理 ;检测原理;血细胞计数原理;一、电阻抗法;小孔管是电阻抗法细胞计数的一个重要组成部分。检测期间,当电流接通后,位于小孔两侧的电极产生稳定的电流。如果供给的阻抗也是稳定的,则小孔的电压是不变的。
;当有一个细胞通过小孔时,由于电阻增加,于瞬间引起电压变化——通过脉冲。
细胞体积越大,脉冲振幅越高;细胞数量越多,脉冲数量也越多。
;脉冲信号经过下列步骤,得出细胞计数结果:
放大 由于血细胞通过微孔时产生的脉冲信号微弱,必须通过放大器将讯号放大。
2. 阈值调节 在一定范围内调节参考电平的大小,使计数结果尽可能符合实际。;3. 甄别 利用甄别器根据阈值调节器提供的参考电平,将低于参考电平的假讯号(细胞碎片,杂质微粒)去掉。
4. 整形 通过整形器作用,将脉冲讯号波形修整成一致标准的平顶波,才能触发电路;5 计数 血细胞的脉冲信号 放大 甄别 整形后,送入计数系统,得出计数结果。
电阻抗法可准确测量出细胞(或类似颗粒)的大小,是三分群血液分析仪的主要应用原理,并与光学检测原理组合应用于五分类血液分析仪中。;三分群血液分析仪基本组成;④甄别器 去除非参考电平的各种假信号以提高计数的准确性。
⑤整形器 将不一致的脉冲波形信号调整为标准的波形后触发计数电路系统。
⑥计数系统 将整形后的血细胞脉冲信号显示为不同类群的细胞数。
;二、激光散射法;;;低角度散射光(前向散射光):反映细胞的数量和表面体积大小。
高角度散射光(侧向散射光):反映细胞的内部颗粒、细胞核等复杂性。;激光散射法在区别体积相同而类型不同的细胞特征时,比电阻抗法分群更加准确。故激光散射法已成为现代五分类血液分析仪的主要检测原理之一。;流式细胞仪的技术特点;;通常把标本流的流速控制在10m/s以内,就能保持标本流处于稳流状态。
外面包被有高速流动的鞘液,实现标本与鞘液稳定的同轴流动状态。
同时利用液流聚焦原理,使标本流直径变小,通常只有10~20μm,避免细胞多个重叠进入检测区。;激光散射法系统基本组成;3、细胞悬液 被检测细胞(颗粒)的悬液,由气压导入流动池。
4、光检测器 接受来自各种角度的散射光或吸收光信号,并转换成相应特征的电信号;三、射频电导法;;四、分光光度法;
分光光度法是所有类型的血细胞分析仪检测Hb 的原理:被稀释的血液加入溶血剂后,红细胞溶解,释放血红蛋白,后者与溶血剂结合形成Hb衍生物,在特定波长(530~550nm)下比色,吸光度的变化与液体中Hb含量成比例。;;血红蛋白测定的溶血剂;分群;
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