云南西盟蔗区发现检疫性病害甘蔗白叶病.PDFVIP

农学学报 2019,9(5):20-23 Journal of Agriculture 云南西盟蔗区发现检疫性病害甘蔗白叶病 张荣跃，李文凤，黄应昆，王晓燕，单红丽，李 婕，仓晓燕，罗志明，尹 炯 （云南省农业科学院甘蔗研究所/云南省甘蔗遗传改良重点实验室，云南开远661699） 摘 要：研究旨在明确2018 年在云南西盟蔗区发现的甘蔗病害是否为植原体引起的甘蔗白叶病。使用 植原体16S rRNA 基因序列通用引物P 1/P7 和R 16F2n/R 16R2 对10份采自云南西盟蔗区的疑似甘蔗白叶 病样品进行巢氏PCR 检测，并将巢氏PCR 产物进行克隆测序和序列分析。巢氏PCR 结果表明：所有10 份样品均能扩增得到1240 bp 左右的片段。测序结果表明所有获得的10条16S rRNA 基因序列大小均 为1247 bp ，序列间的核苷酸一致性为100%。BLASTN 分析表明，从病株扩增到的所有核苷酸序列与先 前云南临沧甘蔗白叶病植原体分离物LC7 和LC9 的16S rRNA 基因序列（Genbank 登陆号：KR020691 和 KR020692 ）的核苷酸序列一致性为100%。虚拟RFLP 分析表明，西盟分离物的16S rRNA 基因序列的酶 切图谱与16SrXI-B 亚组植原体相同。本研究结果表明，云南西盟蔗区发现的甘蔗病害为16SrXI-B 亚组 植原体引起的甘蔗白叶病。 关键词：云南；西盟；检疫性病害；植原体；甘蔗白叶病；16SrXI-B 亚组 中图分类号：S435.661 文献标志码：A 论文编号：cja AQuarantiningSugarcaneWhiteLeafFoundinCane-growingRegionsinXimeng,YunnanProvince ZhangRongyue,LiWenfeng,HuangYingkun,WangXiaoyan,ShanHongli,LiJie,CangXiaoyan, LuoZhiming,YinJiong (SugarcaneResearchInstitute,YunnanAcademyofAgriculturalSciences/YunnanProvince KeyLaboratoryofSugarcaneGeneticImprovement,Kaiyuan661699,Yunnan,China) Abstract: Thestudyinvestigatedwhetherthesugarcanediseasefoundincane-growingregionsinXimeng, YunnanProvincein 2018 wassugarcanewhiteleafcausedbyphytoplasma.WeperformednestedPCRwith phytoplasmauniversalprimerpairs(P1/P7 andR16F2n/R16R2)toidentify 16SrRNAgenesfordetectionof SCWLphytoplasmain 10suspectedSCWLsamplescollectedfromXimeng.Amplifiedproductswerecloned, sequencedandanalyzed.TheresultsofnestedPCRshowedthatabout 1240bpnestedPCRamplifiedfragment couldbeobtainedfromall 10samples.Thesequencingresultsshowedthatthe 1016SrRNAgenesequences wereall 1247bpinlengthandthenucleotideidentitybetweenthesequenceswas 100%.BLASTNanalysis reve