脂质的薄层层析-公开课件.pptVIP

实验二  脂 质 的 薄 层 层 析 【实验目的】 学习脂质的薄层层析的基本原理及操作方法 【实验原理】 由于硅胶G对各种不同脂质的吸附能力不同，故用硅胶G做成薄板，以石油醚-丁酮-乙酸的混合液为展开剂，对食用油进行层析，能使各成分分离，并以标准样品作对照，经显色后，比较它们的Rf值，即可鉴定其成分。 脂质中不饱和键能将显色剂中的酸性重铬酸钾还原，酸性重铬酸钾由棕黄色变为绿色。 各种脂质在硅胶薄层上的移动速率用Rf（Rate flow）值表示： 【实验器材与试剂】 （1）硅胶G （2）展开剂：石油醚-丁酮-乙酸（体积之比为95:4:1） （3）胆固醇标准液（1g/L） （4）三油酸甘油酯标准液（1g/L） （5）油酸标准液（1g/L） （6）玉米油 【实验步骤】 1、薄板制备：称取硅胶G 4.5 g 置于研钵中加入蒸馏水14ml。研匀1.5 min后迅速倒于玻片上，晃动玻片让匀浆自然扩散开，边角可用研磨棒涂抹使其均 匀分布。待凝固后，置 110℃烘箱中烘干1h备用。 (温度达到后计时) 2、配展开剂：50ml 石油醚-丁酮-乙酸（体积之比为95:4:1）。将配好的展开剂放入层析缸中，盖好。（液面不高于点样处） 3、点样：不要画线，用毛细玻璃管分别吸取各种脂质的标