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三、实验操作:包埋法固定细胞 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。 1、包埋法固定细胞: 即将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中。 2、包埋时常用的载体包括: 海藻酸钠: 一种天然多糖,是由海带中提取的天然多糖碳水化合物,可作为食用的食品添加剂,也可作为支架材料用于医学用途,其温和的溶胶凝胶过程、良好的生物相容性使其适于作为释放或包埋药物。 三、实验操作 (一)制备固定化酵母细胞 (二)用固定化酵母细胞发酵 (一)制备固定化酵母细胞 1、酵母细胞的活化: 在缺水状态下,微生物处于休眠状态。活化是指让处于休眠状态的微生物重新恢复正常生活状态的过程。 1g干酵母+10mL蒸馏水→50mL烧杯→搅拌均匀→放置1h,使之活化。 〖思考〗活化是指什么? 酵母细胞活化时体积会变大,因此活化前应该选择体积足够大的容器,以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。 2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液: 0.83gCaCl2+150mL蒸馏水→200mL烧杯→溶解备用。 〖思考〗为什么要用蒸馏水,而不用自来水? 防止自来水中各种离子影响实验结果 溶解物质要彻底。 3、配制海藻酸钠溶液 0.7g海藻酸钠+10mL水→50mL烧杯→酒精灯微火(或间断)加热,并不断搅拌,使之溶化→蒸馏水定容到10mL。 加热时要用小火,或者间断加热,并搅拌,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止 〖思考〗为什么要用小火或间断加热,并不断搅拌? 防止海藻酸钠发生焦糊。 429572439gao 429572439gao 429572439gao 429572439gao 429572439gao 429572439gao 429572439gao 429572439gao 429572439gao 429572439gao 429572439gao 429572439gao 酵母细胞的固定化 课题3 酵母细胞的固定化 课题背景: 1.酶应用时存在的实际问题。 (1)对______________________和_________等条件非常敏感,易失活。 (2)酶很难回收,不能被______________,提高了生产成本。 (3)反应后酶会混在产物中,可能影响产品的质量 强酸、强碱、高温 有机溶剂 再次利用 2.固定化酶的优点: 酶既能与反应物接触,又能与产物分离,还可以被____________ 反复利用 3.固定化细胞的优点: 与固定化酶技术相比,固定化细胞制备的成本____________,操作__________ 更低 更容易 基础知识: (一)酶和细胞固定化方法 思考:固定化酶或固定化细胞可以采取哪些方法? 各有什么利弊? 1、物理吸附法 2、包埋法 3、化学结合法 (二)酶和细胞固定方法的选择 ①酶适合采用化学结合和物理吸附法固定 ②细胞适合采用包埋法固定 1、方法 2、原因 ①细胞个大,酶分子很小 ②个体大的细胞难以被吸附或结合而个小的酶容易从包埋的材料中漏出 生产优点: 反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量 (三)固定化酶的应用实例 1、高果糖浆 三、实验操作 (一)方法 1、包埋法固定化细胞 2、海藻酸钠作载体包埋酵母细胞 (二)制备固定化酵母细胞 1.酵母细胞的活化 2.配置物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液 3.配置海藻酸钠溶液 4.海藻酸钠与酵母细胞混合 5.固定化酵母细胞 一、课题背景 阅读课题背景并思考: 1、直接使用酶制剂在应用中各有什么优、缺点?如何解决使用酶制剂时的缺陷? 2、固定化酶技术在应用中各有什么优、缺点?如何解决使用固定化酶技术在应用时的缺陷? 3、固定化细胞在应用中各有什么优、缺点? 1、直接使用酶制剂 ①天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活 ②溶液中酶很难回收,不能再次利用,提高了生产成本 ③反应后,酶会混在产物中,影响产品质量,难以在工业生产中广泛应用 (1)优点 (2)缺点 催化效率高、低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域 如何解决这些问题? 1、直接使用酶制剂 (3)解决方案 固定化酶技术 2、固定化酶 (1)含义: 将酶固定在不溶于水的载体上。 (3)优点: 酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用。 (4)缺点: 一种酶只能催化一种化学反应,而在实际生产中,很多产物的形成是通过一系列的酶促反应才能得到。 (5)解决方案: 固定化细胞技术 (2)实例: 利用固定化酶技术生产“高果糖浆”。 固定化酶的应用实例:生产高果糖浆 1、什么是高果糖浆?使用它有何好处? 高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品,高果糖浆不会像蔗
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