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课题3 分解纤维素的微生物的分离 纤维素: 棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物 纤维素能被土壤中微生物分解利用,这是因为他们能够产生纤维素酶 讨论:食草动物是怎样消化食物中纤维素的? 在草食性动物等的消化道内,也共生有分解纤维素的微生物,其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素。 纤维素生物燃料: 最有希望替代石油的能源 科学家正致力于研究,怎样将农业废弃物,木材及生长更为迅速的草本植物,转化为种类繁多的生物燃料(甚至是航空燃料) 一、基础知识 1.纤维素 纤维素是以一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,是地球上含量最丰富的多糖类物质 2.纤维素酶 纤维素酶是一种复合酶,一般认为至少包括三组分,即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶 (一)纤维素和纤维素酶 纤维二糖 C1酶、Cx酶 葡萄糖苷酶 葡萄糖 纤维素 【思考】 实验分析:P27 对照组 实验组 实验说明:纤维素酶可以分解纤维素 (二)纤维素分解菌的筛选 1.方法: 刚果红染色法 该方法通过颜色反应直接筛选 2.原理: 刚果红可以与纤维素形成______________,当纤维素被____________分解后,红色复合物无法形成,出现以纤维素分解菌为中心的___________,可以通过_______________________来筛选纤维素分解菌。 红色复合物 纤维素酶 透明圈 是否产生透明圈 空白的刚果红培养基 纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明带 从功能上看,这是一种什么培养基? 鉴别培养基 二、实验设计 (一)实验流程 土壤取样 选择培养(可省略) 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 * 1、纤维素分解菌选择培养基属于______(固体、液体)培养基,原因是__________ 【资料二】选择培养 阅读资料二“选择培养基”,回答以下几问题: 液体 没有添加琼脂 2、该培养基对微生物_____(具有,不具有)选择作用。如果具有,其选择机制是 ____________________________________________________________________________ 具有 以纤维素粉为唯一碳源,能分解纤维素的微生物可以大量繁殖; * 若设置一个对照实验说明选择培养的作用,应控制的变量是将__________改为_________。 3、你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用? 葡萄糖 纤维素粉 提示:自变量为培养基的种类,即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。 1、土壤取样 地点:富含纤维素的环境中 2、选择培养 目的:增加纤维素分解菌的浓度 选用的培养基: 液体选择培养基 可以设计一个牛肉膏蛋白胨培养基做对照试验 3、鉴别纤维素分解菌的培养基——刚果红培养基 染色法 优点 缺点 先培养微生物,再加入刚果红 倒平板时就加入刚果红 颜色反应基本是纤维素分解菌的作用 操作繁琐,刚果红可能会使菌落之间发生混乱 操作简便,不存在菌落混杂问题 产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈,与纤维素分解菌不易区分 两种方法的比较 有可能刚果红染液把一个菌落的菌冲到另一个菌落里,这样的话菌落就可能不是单菌种了,挑菌摇菌的时候有可能得到混合菌
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