人snapin基因真核表达构建及对HBV的体外研究.doc

作者介绍：陈欢，Email：chenhuanxn@163.com，研究方向：肝脏疾病，联系电话 通信作者：李龙江， lljlyy2003@163.com 人Snapin基因真核表达构建及对HBV的体外研究 陈欢1，马磊1，陈倩竹1，姜蓉2，张力1，王亚平2，李龙江1 （1.重庆医科大学病理生理学教研室；2.重庆医科大学干细胞与组织工程研究室，重庆 400016） 【摘要】目的 构建重组表达质粒?pReceiver-M51-Snapin，转染HepG2.2.15细胞，检测其对HBV抗原分泌的影响并探讨其初步机制。方法 根据GenBank中人源Snapin的mＲNA序列，设计引物，构建Snapin真核表达载体pReceiver-M51-Snapin，将其转染HepG2.2.15细胞，倒置荧光显微镜观察转染效果，Western Blot法检测转染细胞中Snapin蛋白的表达；ELISA 法检测 HBsAg 和 HBeAg 的表达。结果成功构建了真核表达载体pReceiver-M51-Snapin；质粒转染HepG2.2.15细胞48h后，与空质粒转染组、DMEM正常细胞对照组相比，转染组中Snapin蛋白的表达量明显升高。ELISA结果显示，转染组HepG2.2.15细胞的HBsAg和HBeAg分泌量明显高于DMEM正常细胞对照组（p0.05）。结论 成功构