CELL-清洗包装和消毒-公开课件.ppt

清洗、包装和消毒;教学目的：;1．清除表面残留的有毒有害物质及微生物。 2．改变玻璃表面性质。; 纯化水的常用制备方法有两种： （1）去离子法与双蒸器结合法;纯化水制备应注意事项：;2、去污剂的选择和使用;培养器具的材料、结构不同，清洗的方法有别 。 ;玻璃器皿的清洗：;4.浸酸、清洗：浸酸6小时以上，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗20次，最后蒸馏水冲洗9次和用三蒸水洗3次（目的？）。 5.烘干、包装：洗干净后先烘干或自然晾干，然后用牛皮纸（油光纸）包装。 6.高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内消毒，120℃，30min。 7.高压消毒后再烘干备用，并做好标记。 ; 旧的玻璃器皿清洗步骤：浸泡、刷洗、浸酸、冲洗 （1）浸泡：用后立即用自来水浸泡 目的：1、用过的玻璃器皿上含有大量的蛋白质和油脂， 干涸后不易刷洗掉 2、不浸泡则夏天宜???虫 ;（3）浸酸 （目的？） 酸液又称清洁液,有强氧化作用。 根据需要选用强酸、次强酸、弱酸及常用方。 器皿被完全覆盖，不能有气泡， 浸酸不少于六小时。 器皿放入酸液时，小心操作，防止溅出， 注意安全！ ; 据含硫酸不同，分为常方、强酸、次强酸和弱酸四种： ;配制清洁液的步骤：;配酸和浸酸时应注意事项：;专用耐酸塑料容器。如图;;;（4）冲 洗 捞酸（检查手套是否漏） 放入塑料盒（冲至无色、无气泡、干净，不干净的重新刷洗步骤），“注满自来水-倒空”或注入“2/3自来水后振荡冲洗” 20次以上→蒸馏水冲洗9次→三蒸水3次→烘干或晾干 →包装灭菌备用 被污染的需要先用理化方法进行灭菌处理！ 煮沸30min或2﹪-5% 的盐酸中浸泡过夜。;（二）、瓶盖的清洗和包装;（三）、橡皮管的清洗;（四）、塑料制品的清洗;（五）不锈钢除菌滤器的清洗;（六）金属器械的清洗;;包装的方法：;三、消毒和灭菌;（一）物理消毒法（５种） 1.紫外线消毒 作用机制:直接:破坏核酸及蛋白质。 　　　　　　间接:产生的臭氧杀死微生物。 　作用效果：消毒效果同其辐射强度和照射剂量呈正相关　　　（紫外线照射工作台面不应超过１．５ｍ，照射时间３０ｍｉｎ） 　注意事项：对皮肤眼睛有伤害，对培养细胞与试剂有不良影响 ，不能开着紫外灯工作 ;２．电离辐射消毒;钴-60害了一家人 　　1993年5月，山西省忻州市一位农民捡到忻州市科委辐照站的一个废弃放射源———钴-60。他好奇地把这个亮晶晶的小东西放进了上衣口袋里，几小时后便出现了恶心、呕吐等症状，十几天后就死了。没过几天，在他生病期间照顾他的父亲和弟弟也因同样症状而相继去世，妻子也病得不轻。后经专家调查，发现那个废弃的钴-60是罪魁祸首，其放射性强度高达10居里，足以“照死人”。;３.湿热灭菌 （１）高压蒸汽灭菌法 原理：蒸汽的穿透力，使蛋白质变性凝固，微生物死亡． 普通物品：120℃,30min ；培养用液及橡胶125℃，10min 注意事项： 1、消毒锅本身的洁净； 2、包装方式和包装用品应有利于蒸汽的侵入和流出，还要有效的避免污染； 3、消毒锅内不能堆积太满，要利于蒸汽穿过； 4、消毒结束冷却时，应标记已消毒； 5、取出消毒物后，应立即放到烘箱内烘干。 （２）煮沸消毒法;４.干热灭菌（１６０℃，90min-２h） 用于不能与蒸汽直接接触的物品及不会被高温损坏的物品。 注意事项： ａ、消毒后，先关闭电源，等温度降下来后再开烘箱门，防止骤冷导致玻璃器皿破损及外界空气进入； ｂ、物品之间要留有空隙，使物品尽量受热均匀； ｃ、放置物品时要远离热源物质，防止局部过热引起包装纸烧焦。 ５.过滤除菌 用于遇热不稳定的试剂或培养液。 ;按过滤介质即过滤板的结构归纳为三类： 　深度滤板，筛状滤板，膜状滤板 膜状滤板孔径从0.1μm 到10μm 　滤膜的性质： 耐高温，可干燥加热到200℃。 耐高压。 ;正压过滤系统程序;负压过滤系统程序;正压过滤优点： 1）流速高，过滤快； 2）可减少污染 3）过滤蛋白质时可避免产生大量气泡。 4）利于过滤沸点低的试剂。 负压过滤： 1）真空瓶与外界之间的任何微小通路都可能造成污染。 ２）容器内呈真空，沸点低的试剂会不断挥发。 ;（二）化学消毒法;甲醛产生气体的方法： （1）多聚甲醛加热法：将多聚甲醛研成粉末，铺在金属板上，加热至150℃以上即产生甲醛气体。 多聚甲醛用量为每平方米10-20g，作用时间12-24小时。 ;（2）甲醛水溶液蒸发法：将40%甲醛水溶液（福尔马林）倒入