单分子拴球试验在生医研究的应用.pdf

單分子檢測 專題 單分子拴球實驗在生醫研究的應用 Single-Molecule Tethered Particle Motion in Biomedical Research 陳晏誠、范秀芳、李弘文 Yen-Cheng Chen, Hsiu-Fang Fan, Hung-Wen Li 單分子拴球實驗為一簡單量測蛋白質與DNA 作用情形的單分子技術。利用高解析的光學顯微技術，我們 得以準確地觀測接連在 DNA 及玻片表面的乳膠小球之布朗運動情形，並藉由其布朗運動的大小直接對應 到在生化反應中DNA 長度的變化，因此單分子拴球實驗已被廣泛地應用於研究單一蛋白質與單一DNA 分 子作用之反應機制。我們更利用在乳膠小球上施加一微小伸展力來抑制其布朗運動大小，並藉此改良出施 力式拴球實驗。此施力設計不僅改善實驗之解析度，擴展可應用之DNA 長度範圍，並得到一理論可預測 之DNA 長度與布朗運動的線性關係。此施力式拴球實驗已被用來研究RecBCD 解螺旋與DNA 分子作用 情形，發現此解螺旋分子沿DNA 移動時，藉由辨識DNA 特殊序列來調控其性質，並表現出移動速率由 快轉慢之改變。 Tethered particle motion (TPM) method is a simple technique to study the p