第3章食用菌菌种的制作-公开课件.ppt

第三章食用菌菌种的制作 二、原种，也称二级菌种 原种鉴定： 洁白，健壮，有凝水，不干燥 三、栽培种，也称三级菌种 栽培种鉴定：洁白，健壮，有凝水，不干燥, 一般不超过25-35天 第二节 培养基 根据各种食用菌生长时对营养物质的要求，用人工方法配制而成的营养基质，供菌丝生长发育，把这种营养物质叫培养基。它如同农作物需要土壤、肥料，动物需要饲料一样。 目前，人们采用的培养基相当多，种类各不相同。不论哪种培养基都有共同特点：一般都含有水分、碳源、氮源、无机盐以及生长因子等。 碳源是构成细胞物质的主要元素，也是食用菌生长发膏所需能量来源。碳源的主要原料是糖类、淀粉、纤维素物质。代表物质是葡萄糖、蔗糖、玉米粉、麸皮、米糠、锯木屑、棉籽壳等。 氮源是食用菌细胞质和细胞核中蛋白质和核酸的主要元素，蛋白质和核酸是生命的基本物质。一切生命活动都离不开这些物质。氮源主要有氨基酸、蛋白胨、尿素、硫酸铵、含有氮素的物质有玉米、棉籽壳。 培养基中的无机盐虽用量不多；但不可缺少，它主要是酶类的组成成分，调节各种生命代谢活动，如磷酸二氢钾、硫酸镁。 生长因子需要量很少，是培养基中的特殊营养物质，它是维持食用菌正常生长所不可缺少的生长因素。如马铃薯、 麸皮、米糠等都含有丰富的生长因子，维生素也属此类。 1.天然培养基：它是利用天然的有机物配制而成的培养基。这种培养基来源广，成本低，很适合实际生产。特别具备营养丰富、制备方便、经济实用等优点。但他学成分不能定量，每批成分也不稳定，因此不宜用来进行精确的科学实验。 常用的天然培养基，有马铃薯培养基、麦芽汁培养基、杏汁培养基、苹果培养基、麦芽培养基、堆肥培养基等。 2.半合成培养基：在天然培养基中，适当增加无机盐类，或在合成培养基中添加少量别的有机物，成为半合成培养基，介于天然培养基和合成培养基之间。主要目的是促进菌丝生长发育。 3.合成培养基：用化学成分已知的有机物或无机物配制而成的培养基。由于各种化学成分已经清楚，容易控制，所以适合某些定性和定量研究。 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）： 　　马铃薯（去皮）200克　　葡萄糖 20克 　　琼脂 18～20克 　　PH值 5.5～6.0 制法：先将新鲜无病害的马铃薯洗净，去皮后切成小薄片，称200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后过滤，其滤汁为马铃薯煮汁，然后加琼脂和葡萄糖煮溶，后补足水分至1000毫升，装管（瓶）灭菌备用。 一般食用菌母种的分离和培养都适合此培养基。 培养基的灭菌 培养基装好后就要立即进行灭菌；将其中的杂菌杀死，然后才能接入我们所需要的纯菌种，进行培养。 不论是母种分离时用的斜面培养基，还是原种、栽培种瓶培养基或聚丙烯塑料袋培养基，一般都采用热力灭菌法。 高压蒸汽灭菌法： 若是斜面试管培养基，应在1 kg/cm2 （121℃）压力下维持30分钟，即可达到灭菌目的。开锅取试管时，趁热放成斜面。 灭菌材料如是原种和栽培种，应在1.5 kg/cm2 （128℃）压力保持60～90分钟，这样才能达到灭菌目的。 常压蒸汽灭菌法：如没有具备高压锅，可用土蒸锅或蒸笼进行。在常压的条件下，以 100℃的温度持续6～8小时，以杀死培养料中的各种杂菌。 也可采用常压间歇灭菌3次，可先蒸1小时，然后隔24小时又如法蒸1次，连续3次，就可达到灭菌目的。 灭菌效果检验 培养基的灭菌效果要经常检验，是否灭菌彻底：一般情况下，灭菌后的培养基最好应放在要培养的温度下，空白培养1周，可检查灭菌效果。如果在这一段时间内培养基没发生任何变化，说明灭菌效果良好，可以使用。 液体菌种 简言之就是将纯正优良的菌种，接入液体培养基（固体培养基不加凝固剂），使菌丝繁殖形成大量小菌球，然后将这种培养基拌入木屑或棉籽皮料内，制成菌块、培养其形成子实体。还可用于制原种、栽培种。 目前，用液体深层发酵法生产菌种，具有生产量大、周期短、菌龄整齐、成本低廉、接种方便等特点，是实现食用菌工厂化生产的目标。 生产上常用的栽培种 木屑、棉籽壳菌种 麦粒菌种 玉米粒菌种 木块菌种 木筷菌种 牙签菌种 接种技术与环境的消毒 接种箱（接种室） 接种室和接种箱是进行菌种分离接种的场所，和外界空间隔绝，防止空气流动，经过一定的消毒措施后，室内就可达到无菌状态，防止分离和接种时污染杂菌。一般一个接种箱就可展开工作，如有条件也可建一个接种室。 无菌箱及无菌室的消毒灭菌 l．用甲醛和高锰酸钾混合熏蒸：一般每平方米需40％甲醛10毫升、高锰酸钾8毫升，进行熏蒸。使用时，先密闭门窗，量甲醛溶液盛入容器中、然后倒入量好的高锰酸钾，人员随之离开接种室，关紧房门，熏蒸20—30分钟即可。 2．0.1％升汞水消毒：用0.1％升汞水浸过的纱布或海绵进行揩擦，或用喷雾器喷雾灭菌，喷雾后