原代培养细胞.ppt

动物的克隆 “动物的细胞和组织培养” 是动物克隆的技术基础 “细胞培养”也是细胞生物学的主要技术基础。 将动物体内的一部分组织取出 分散成单个细胞 人工控制的培养条件下 细胞得以生存并保持生命活动现象 生长、分裂乃至接触抑制和有规律的衰老、死亡性能等 机械消化、胰酶消化 （一）定义： P28 一、动物细胞的培养 原理：细胞增殖 ①无菌、无毒 （消毒、灭菌 ；可添加抗生素；定期更换培养液，清除代谢废物 ） ②营养： （液体培养基：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等） ③温度和pH ：（36.5±0.5℃，pH7.2~7.4 弱碱性） ④气体环境：O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） （二）操作流程及过程解读： 离体的动物细胞如何才能保证其正常的生命活动？需要哪些条件？ 1、培养条件： CO2培养箱,维持培养的PH值 可以补充合成培养基中缺乏的物质 动物体内一部分组织 分散成单个细胞 机械消化 或 胰蛋白酶酶解 原代培养 传代培养 细胞悬浮液 细胞株或细胞系 动物培养液 细胞形成生长晕并增大 取样 剪碎 分装 含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。 2、过程：（P29图） 应选择幼龄动物组织或胚胎 使细胞与外界充分接触；与外界物质交换更迅速高效； 取动物胚胎或幼龄动物器官和组织 因为这些组织或