莱菔子饮片成分分析及炮制原理研究(Ⅰ)-中药学专业论文.docxVIP

第三部分 莱菔子生、炒品量变成分的鉴定和含量测定方法的建立 19 1 生、炒莱菔子量变成分的提取、分离、鉴定 19 1.1 实验材料 19 1.2 样品的提取与分离 19 1.3 化合物的结构鉴定 19 2 A209 含量测定方法的建立 20 2.1 实验材料 20 2.2 色谱条件 20 2.3 供试品溶液的制备 21 2.4 对照品溶液的制备 23 2.5 A209HPLC 检测方法学的考察 23 2.6 不同炮制品中 A209 的含量测定 25 2.7 小结 26 第四部分 莱菔子生、炒品量变成分 A209 药效学初步研究 27 1 A209 与功效相关药理活性的初步研究 27 1.1 实验材料 27 1.2 实验方法与结果 28 1.3 生、炒莱菔子中 A209 部位大剂量组的改进实验 30 2 A209 抗癌活性初步筛选 32 2.1 A209 对 P388 和 hela 的肿瘤抑制活性筛选 32 2.2 A209 对 HL-60、A549、MOLT4、BEL7402 的肿瘤抑制活性筛选 33 第五部分 莱菔子生、炒品高效液相色谱的比较分析 35 1 实验材料 35 1.1 供试饮片 35 1.2 仪器与试药 35 2 供试样品的制备 35 3 实验方法与结果 36 3.1 色谱条件的选择 36 3.2 实验结果 36 4 小结与讨论 36 小结与讨论 42 结 语 44 参考文献 45 致 谢 47 查新报告 48 1 1 莱菔子饮片成分分析及炮制原理研究(Ⅰ) 引 言 饮片入药，依法炮制是中医用药的特色，是辨证施治需要的体现。利用现代科 技手段，探讨饮片炮制后增效、减毒、缓和或改变药性的内在机制，是中药炮制研 究中的核心问题。是揭示炮制原理，规范炮制工艺，控制饮片质量，促进中药现代 化等系列研究的基础工作。 莱菔子为十字花科植物莱菔（Raphnaus satirus L.）的成熟种子。系中医临床常 用消食除胀，降气化痰药。始载于唐末宋初的《日华子本草》，在 1000 多年的药用 及临床实践中，历代医家逐步认识到了其“生熟异治”、“生升熟降”的药性特点。 明·《本草纲目》载：“生能升，熟能降。升则吐风痰，散风寒，发疮疹；降则定痰 喘咳嗽，调下痢后重，止内痛”。清·《本草求真》中总结为：“莱菔子气味甚辛，生 用研汁，能祛风痰，有倒墙推壁之功……。若醋研敷，则痈肿立消。炒熟则下气定 喘，消食宽胀”。前人经验提示，莱菔子“生熟异治”、“生升熟降”药性特点与饮片炮 制和服用方法密切相关。随着临床治疗手段的发展，生品的涌吐风痰作用应用逐渐 减少，多用炒莱菔子入药，以突出其消食除胀，降气化痰的功效。 “十五”期间，通过“莱菔子炮制工艺与质量标准的规范化研究”，从莱菔子中提 取分离了标准物质芥子碱硫氰酸盐，为莱菔子定性、定量鉴别和控制其生、炒饮片 的质量提供了对照品；采用 GC-MS 分析了生、炒莱菔子脂肪油的组成。比较确定 了莱菔子风选、水淘洗的净制工艺；应用均匀设计，以外观性状、水及醇溶性浸出 物、芥子碱硫氰酸盐、脂肪油含量五个指标对莱菔子炒制工艺进行了优选，确定了 适宜的炒制工艺参数，并经化学和不同炮制品的药效学实验，进一步验证了炮制工 艺的合理性。在饮片厂以生产规模进行了四产地十批次的中试试验。对中试生、炒 莱菔子样品，进行了化学、薄层、特征峰等定性鉴别，规定了杂质、水分、灰分、 酸不溶性灰分的限度，测定了水、醇浸出物含量，建立了生、炒饮片中芥子碱硫氰 酸盐、脂肪油的含量测定方法，制定了相应的限度标准，初步完善了莱菔子生、炒 饮片的质量标准。 本文在以上研究的基础上，从中医用药实际入手，利用植物化学、分析化学、 药理学及相关学科的研究手段，结合中医用药特点，对莱菔子生、炒饮片进行了系 PAGE PAGE 2 统的对比分析，以寻找两者间的差异成分或药效的区别为突破口，寻找、确定莱菔 子炮制前后发生明显量变或质变的成分或部位，研究建立炮制后发生变化的成分的 含量测定方法。结合文献和药效学研究，探讨莱菔子炮制前后内在成分变化与炮制 机理的相关性。以期为莱菔子生熟异治和生升熟降的用药特色，提供现代科学依据。 为莱菔子炮制工艺的进一步科学化、规范化，质量标准的客观化，提供专属性依据。 为中药炮制研究中如何体现学科特色，如何借用现代化学和药理学研究方法，在研 究思路和方法学上进行探索，为中药炮制机理研究提供新的借鉴。 第一部分 莱菔子炮制及相关文献概述 莱菔子临床主用炒制品，探讨莱菔子饮片炮制的历史沿革，变化轨迹和原始意 图。参照药理、临床和成分研究的成果，有利于为莱菔子炮制机理的探讨寻找合适 的切入点。参照前期工作，对莱菔子饮片炮制及相关文献概述如下： 1