高中生物选修 实验2 分离以尿素为氮源的微生物.pptxVIP

实验2　分离以尿素为氮源的微生物脲酶(NH2)2C=O+H2O2NH3+CO2实验原理：脲或称尿素，是蛋白质降解的产物。人和其它哺乳动物的尿中都含有尿素，尿素一般不能直接被农作物吸收。有一些细菌含有脲酶，它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源。选择以尿素作为唯一氮源即可分离出此类微生物。选择培养基定义：是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来(即提供有利于目的菌株生长的条件包括营养、温度、pH等，同时抑制或阻止其他微生物生长。 实例应用：1、培养基中加入抗生素可以筛选出抗生素抗性菌2、培养基中缺乏碳源时，可筛选出自养型生物培养基中的尿素在细菌的脲酶催化下分解产生NH3，呈碱性，使细菌周围培养基的颜色发生变化：酸黄碱红制备培养基：(1)全营养LB固体培养基： 蛋白胨0.25g、酵母提取物0.12g、NaCl 0.25g、 琼脂糖0.5g、加水25ml。灭菌待用。(2)尿素固体培养基： 0.025g葡萄糖、NaCl 0.12g、K2HPO40.12g、 酚红0.25mg、琼脂糖0.5g、加水15ml。 灭菌待用。 冷却到60℃时加入经G6玻璃漏斗过滤 （使其无菌） 的尿素溶液。 步骤：1、制平板：在60℃左右时，将两只三角瓶中已灭菌的LB固体培养基和尿素固体培养基，在酒精灯旁分别倒入两个培养