SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量-公开课件.pptVIP

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 ;一、实验目的;二、实验原理;SDS的性质与作用;十二烷基磺酸钠(SDS) Sodium dodecyl sulphate CH3-(CH2)10-CH2OSO3--Na+; 蛋白质变性 0.1-1% SDS 0.1 M 2-巯基乙醇 蛋白质变与SDS分子按比例结合 1 ：1.4;聚丙烯酰胺凝胶性质;聚丙烯酰胺凝胶(PAG)具有三维网状结构，能起分子筛作用。用它作电泳支持物，对样品的分离取决于各组分所带电荷的多少及分子大小。 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)还具有浓缩效应，即在电泳开始阶段，由于不连续pH梯???作用，将样品压缩成一条狭窄区带，从而提高了分离效果。;X;三、实验步骤;配制分离胶溶液;加入分离胶溶液 pH 8.8;配制浓缩胶溶液;分离胶 pH 8.8;加入电极缓冲液pH 8.3;凝胶板剥离与染色;影响电泳速度的外界因素;四、结果分析;五、注意事项