荧光定量pcr的分类七.pptVIP

目录 一、背景知识 二、荧光定量PCR概述 三、荧光定量PCR的主要原理 四、荧光定量PCR定量的理论依据 五、荧光定量PCR定量的理论模式 六、荧光定量PCR的分类 七、传统的定量PCR的难点 八、荧光定量PCR的优点 九、怎样设计荧光定量PCR实验方案 十、荧光定量PCR技术在科研中的应用 一、背景知识 1、1985 年，美国Perkin-Elmer Cetus 公司人类遗传研究室Mullis 等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应（Polymerase chain reaction, PCR），使人们梦寐以求的体外无限扩增核酸片段的愿望成为现实。 2、1992 年，Higuchi最早提出了实时PCR 的设想，它的基本思想是利用荧光染料EB（溴化乙锭）可以插入到双链核酸中受激发光的性质，在PCR反应的退火或延伸时检测掺入到双链核酸中EB的含量就能实时监控PCR反应的进程，根据PCR反应的数学函数关系，结合相应的算法，通过加入标准品的方法，就可以对待测样品中的目标基因进行准确定量。（陈旭等，2010） 3、到1995 年，美国PE公司研制成功具有革命性意义的荧光定量PCR技术，融合了PCR高灵敏性、DNA杂交的高特异性和光谱技术的高精确定量等优点，直接探测PCR过程中荧光信号的变化，以获得特定区段扩增产物定量的结果，不需要PCR后处理或电泳检测，完全闭管操作（整个过程中仅有加入样