棉籽粕源发酵蛋白质饲料的代谢产物研究-动物营养学报.pdf

动物营养学报２０１２，２４（８）：１６０２１６０９ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ 　 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６２６７ｘ．２０１２．０８．０２７ 棉籽粕源发酵蛋白质饲料的代谢产物研究 １ １ １ ２ ２ 聂存喜 　张文举 　闫理东 　蒋粒薪 　马贵军 （１．石河子大学动物科技学院，石河子 ８３２００３；２．新疆天康畜牧生物技术股份有限公司 生物添加剂分公司，乌鲁木齐 ８３００１１） 摘　要：本试验旨在通过液相色谱串联质谱（ＬＣＭＳ）代谢组学分析平台对不同微生物棉籽粕 源发酵蛋白质饲料代谢产物进行研究。采用ＬＣＭＳ法对对照组、假丝酵母组、酿酒酵母组、复 合组的发酵代谢产物进行分析，结合偏最小二乘法－判别分析（ＰＬＳＤＡ）方法对数据进行模式 识别和小分子差异代谢产物寻找。结果表明：各试验组代谢产物相对含量与对照组相比差异显 著（Ｐ＜０．０５），且在ＰＬＳＤＡ分析中得到了很好的分离，主要表现在甘露醇、琥珀酸等糖类代谢 产物；磷酸胆碱、Ｌ－肉碱、甘油磷酸、磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）和磷脂酰胆碱（ＰＣ）等脂类代谢产物； 二肽、三肽、甜菜醛、同型半胱氨酸等蛋白质与氨基酸的代谢产物；以及烟酸、阿魏酸、尿嘧啶、乙 醇醛等其他途径代谢产物。除与脂类代谢有关的甘油磷酸、ＰＥ、ＰＣ相对含量显著降低之外（Ｐ＜ ０．０５），其他试验组小分子代谢产物相对含量均比对照组显著增加（Ｐ＜０．０５）。由此可见，不同 菌种发酵饲料中含有大量糖类、脂类、蛋白质等代谢途径产生的小分子代谢产物，含量因发酵菌 种的不同而不同。 关键词：液相色谱串联质谱；代谢产物；发酵；蛋白质饲料 中图分类号：Ｓ８１６．３　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１００６２６７Ｘ（２０１２）０８１６０２０８ 　　随着畜牧业的快速发展，蛋白质饲料资源的 科学等领域的研究中，在动物营养、饲料添加剂和 匮乏日趋明显。棉籽粕产量大、蛋白质含量高，是 微生物发酵农副产品等饲料资源的开发利用方面 ［１０］ 动物很好的蛋白质饲料来源。棉籽粕经微生物发 具有很大的潜力和应用价值 。本研究基于代谢 酵处理后可消除游离棉酚对动物的毒害作用，同 组学技术，以棉籽粕源发酵蛋白质饲料为研究对 时发酵产物中产生许多微生物代谢产物，这些代 象，利用液相色谱串联质谱（ＬＣＭＳ）技术研究其 谢产物包括各种氨基酸、脂肪酸、寡糖、维生素、小 发酵产物代谢产物组分的变化，为微生态发酵饲 肽、增味剂以及芳香物质等，研究这些代谢产物的 料的科学评定和深度利用提供理论依据。 种类和数量，对于棉籽粕源发酵饲料的开发利用 和科学评定具有重要意义。然而，目前的研究多 １　材料与方法 集中在棉酚脱毒菌种的筛选［１－３］、发酵前后常规养 １．１　试验材料 分的变化［４－６］及其发酵底物参数优化［７－９］等方面， 　　发酵底物：棉籽粕５８％、豆粕５％、玉米蛋白 未从细胞代谢水平来研究微生物棉籽粕源发酵蛋 粉９％、玉米 ２０％、麦麸 ８％，调节水分含量至 白质饲料营养特性进行研究。代谢组学作为一种 ４０％，在０．０５６ＭＰａ条件下，１１２．６℃灭菌２０ｍｉｎ。 高通量、高灵敏度、高精确度的分析技术，广泛应 　　菌株：热带假丝酵母 ＺＤ３（Ｃａｎｄｉｄａｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ 用于微生物学、食品学、营养学、毒理学以及环境 ＺＤ３，ＣＴ）、酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ， 收稿日期：２０１２－０２－１７ 基金项目：国家自然科学基金项目；石河子大学科技成果转化引导资金专项（ｋｊｋｆｙｚ