物质发光分析.ppt

荧光猝灭：?碰撞猝灭；?静态猝灭；?转入三重态的猝灭； ?电子转移猝灭；?自猝灭。 内滤作用和自吸现象：当溶液中存在能吸收荧光物质的激发光或发射光的物质时，也会使体系的荧光减弱，这种现象称为内滤作用。 　　如果荧光物质的荧光发射光谱在该物质的吸收光谱有重叠，当荧光物质浓度较大时，一部分荧光发射可被自身吸收， 从而使荧光强度降低，称为自吸。这种自吸现象也是一种内滤作用。 六．定量分析 （?，荧光量子产率） 这种线性关系只有在极稀的溶液中才成立。对于较浓的溶液，由于猝灭现象和自吸收等原因，使荧光强度与浓度不成线性关系。 荧光强度大小与: （1）荧光体浓度成正比; （2）激发光强度成正比; （3）测量仪器有关. * Absorbance Deviation (%) 0.001 0.1 0.01 1.1 0.05 5.5 0.10 10.6 0.20 19.9 Table. Deviation from linearity in the relation between fluorescence intensity and concentration for various absorbances §２．荧光仪器 第一单色器 或滤光片 记录仪 第二单色器 或滤光片 荧光 光源 激发 样品池 1）光源：氙灯、高压汞灯、激光； 2）样品池：石英（低荧光材料）； 3）两个单色器：选择激发光单色器；分离荧光单色器； 4）检测器：光电倍增管。 特殊点：有两个单色器，光源与检测器通常成直角。 * § 3.荧光分析法的应用 (1)无机化合物的分析 与有机试剂配合物后测量；可测量约60多种元素。 铍、铝、硼、镓、硒、镁、稀土常采用荧光分析法； 氟、硫、铁、银、钴、镍采用荧光熄灭法测定； 铜、铍、铁、钴、锇及过氧化氢采用催化荧光法测定； 铬、铌、铀、碲采用低温荧光法测定； 铈、铕、锑、钒、铀采用固体荧光法测定 (2)生物与有机化合物的分析 见表 * * * 荧光分析的特点： 灵敏度高：视不同物质，检测下限在0.1 - 0.001?g/mL之间。可见比UV-Vis的灵敏度高得多！WHY？ 选择性好：可同时用激发光谱和荧光发射光谱定性。 分析线性范围比吸收光谱法宽许多。 结构信息量多：包括物质激发光谱、发射光谱、光强、荧光量子效率、荧光寿命等。 但采用探针技术可大大拓宽发光分析的应用范围。　 * §４．磷光分析 1. 磷光的特点： 磷光波长比荧光的长(T1S1)； 磷光寿命比荧光的长(磷光为禁阻跃迁产生，速率常数小)； 磷光寿命和强度对重原子和氧敏感(自旋轨道耦合，使kISC增加)。 2. 低温磷光（液氮） 由于磷光寿命长，T1的非辐射跃迁（内转换）几率增加，碰撞失活（振动弛豫）的几率、光化学反应几率都增加，从而降低磷光强度。因此有必要在低温下测量磷光。同时要求溶剂： (1)易提纯且在分析波长区无强吸收和发射；(2)低温下形成具足够粘度的透明的刚性玻璃体。 * 3. 室温磷光 低温荧光需低温实验装置且受到溶剂选择的限制，1974年后发展了室温磷光（RTP）。 1）固体基质：在室温下以固体基质（如纤维素等）吸附磷光体，增加分子刚性、减少三重态猝灭等非辐射跃迁，从而提高磷光量子效率。 2）胶束增稳：利用表面活性剂在临界浓度形成具多相性的胶束，改变磷光体的微环境、增加定向约束力，从而减小内转换和碰撞等去活化的几率，提高三重态的稳定性。 利用胶束增稳、重原子效应和溶液除氧是该法的三要素。 * 三、磷光分析法的应用 稠环芳烃分析 采取固体表面室温磷光分析法快速灵敏测定稠环芳烃和杂环化合物（致癌物质） 农药、生物碱、植物生长激素的分析 药物分析和临床分析 见表 ４、磷光分析法的应用 * * 处于基态的分子吸收能量（电、热、化学和光能等）被激发至激发态，然后从不稳定的激发态返回至基态并发射出光子，此种现象称为发光。物质吸收光能后所产生的光辐射称之为荧光和磷光。这一机理同样适用于说明化学发光和生物发光的原理。 §1 荧光和磷光的基本原理 * 　　电子激发态的多重度可用M = 2S + 1表示（Ｓ＝０或１），多数分子含有偶数电子，根据Pauli不相容原理，分子中同一轨道所占据的两个电子必须具有相反的自旋方向，即自旋配对。假如分子中任一轨道都是自旋配对的，此时S = 0，所以分子的多重度M = 1，分子体系处于单重态，一般用符号S表示。大多数有机分子的基态处于单重态 一.分子荧光和磷光的产生 １．分子吸收和发射过程的能级图（Jab