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生物化学与分子生物学 实验技术 湖南农业大学植物科学实验教学中心 2007年4月 目录 实验一植物体内可溶性糖含量的测定(蒽酮法 (3 实验二醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 (6 实验三水稻种子中蛋白质和淀粉含量的测定 (8 实验四水稻萌发及幼苗期淀粉酶和过氧化氢酶活性测定 (14 实验五植物组织中氨基转移反应及氨基酸的层析分离 (19 实验六不同作物不同发育时期过氧化物酶同工酶的比较分析 (21 实验七用SDS―聚丙烯酰凝胶电泳法测定蛋白质的分子量 (24 实验八植物基因组DNA的提取及含量纯度检测 (27 实验一植物体内可溶性糖含量的测定(蒽酮法 一、目的: 糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。不同载培条件,不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定,可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。 二、原理 糖类遇浓硫酸脱水生成糖醛或其衍生物,反应如下: HO—CH—CH—OH CH—CH | | 浓H2SO4 || || H—CH CH—CHO CH C—CHO + 3H2O | | △ 戊糖糠醛 HO—CH—CH—OH CH—CH | | 浓H2SO4 || || HO—CH2—CH CH—CHO HO— CH2—C C—CHO + 3H2O | | △ OH OH O 已糖羟甲基糠醛糠醛或羟甲基糠醛进一步与蒽酮