305-牛津杯法抑菌试验.docVIP

牛津杯法抑菌试验 1. 原理 将加有牛津杯的双层平板置于培养箱中培养，一方面试验菌（病原菌）开始生长繁殖，另一方面抑菌物质呈球面扩散，形成递减的梯度浓度。牛津杯周围抑菌浓度范围内的细菌生长被抑制，形成透明的抑菌圈，抑菌圈的大小反映抑菌物质对指示菌的抑制程度。 2. 仪器、设备 2.1 超净工作台 2.2恒温培养箱：36±1℃。 2.3恒温水浴锅：50±1℃。 2.4高压灭菌锅。 2.5平皿：直径为9 cm。 2.6 移液器（20~200μL，100~1000μL，1~5mL）及配套无菌枪头。 2.7试管：15×150 mm。 2.8 酒精灯。 2.9试管架。 2.10涡旋混匀器。 2.11摇床：36±1℃。 2.12牛津杯。 3. 病原菌、培养基及其他 3.1病原菌：大肠杆菌：ATCC25922、沙门氏菌: ATCC14028、金黄色葡萄糖球菌：ATCC6538。 3.2 抑菌物质：益生菌（乳酸菌、芽孢菌）、抗生素或其它抑菌物质。 3.3 培养基： （1）大肠埃希菌：营养肉汤、营养琼脂半固体（琼脂粉含量：1%）、营养琼脂（琼脂粉含量：2%）。 （2）金黄色葡萄球菌：营养肉汤、营养琼脂半固体（琼脂粉含量：1%）、营养琼脂（琼脂粉含量：2%）。 （3）沙门氏菌：营养肉汤、营养琼脂半固体（琼脂粉含量：1%）、营养琼脂（琼脂粉含量：2%）。 （4）乳酸菌：MRS肉汤。 （5）芽孢菌：营