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生物化学实验 吕梁高等专科学校生命科学系 生物实验教学中心 二零零九年三月 实验一 糖类的定量测定 —3，5-二硝基水杨酸比色定糖法 一、实验目的 1．掌握3，5 -二硝基水杨酸法定糖的原理及方法。 2．用3，5 -二硝基水杨酸比色法测定红薯中总糖。 3．熟悉分光光度计的原理及使用方法。 二、实验原理 糖类的测定方法有物理方法和化学方法两类。 由于化学方法比较准确，常常使用之。还原糖的测 定 是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基和酮 基的糖类。 3，5一二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕 红色的氨基化合物，在一定范围内，棕红色物质颜色 的深浅程度与还原糖的量成正比。因此，我们可以利 用比色法测定样品中还原糖以及总糖的含量。 该法是半微量定糖法，操作简便、快速，杂质 干扰较少。 三、实验操作 （一）样品中总糖的水解及提取 准确称取红薯 1g，放入小三角烧瓶中，加入10ml6N HCL和15ml蒸 馏水，混匀。在沸水浴加热30min后