聚焦三大数字PCR平台（一）-生物通.PDFVIP

PCR PCR 聚焦三大数字PPCCRR平台（一） 在定量PCR 时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是绝对定量呢？如今， 你无需纠结了，因为数字PCR（digital PCR 或dPCR）来了。尽管这两种技术有些类似， 都是估计起始样品中的核酸量，但它们有一个重要的区别。定量 PCR 是依靠标准曲线 或参照基因来测定核酸量，而dPCR 则让你能够直接数出DNA 分子的个数，是对起始 样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct 值不能很好分辨的应用领域：拷贝数变异、突 变检测、基因相对表达研究（如等位基因不平衡表达）、二代测序结果验证、miRNA 表 达分析、单细胞基因表达分析等。 数字PCR 技术，是通过将微量样品 中检测出突变细胞，但由于当时能 作大倍数稀释和分液（partitioning），直 用于稀释样品的耗材只是 384 孔 至每个样品中所含有的待测分子数不会 板，因此还不能非常好地体现数字 超过1