盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查.ppt

* 实验二： 药物中特殊杂质的检查 一般杂质： 自然界中分布较广，在多种药物的生成和贮存过程中容易引人的杂质，如氯化物，硫酸盐，铁盐，重金属，砷盐等。 特殊杂质： 指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。 药品中的杂质 本次实验内容 阿司匹林肠溶片中游离水杨酸的检查 1 氢化可的松中有关物质的检查 2 盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查 3 一、阿司匹林肠溶片中游离水杨酸的检查 生产工艺： (CH3CO)2O OCOCH3 贮藏水解： OCOCH3 OH H2O [O] [O] 1、杂质来源 阿司匹林无游离酚羟基，不与Fe3+作用，而水杨酸则可与之反应生成紫堇色，可检出1μg的游离水杨酸。 水杨酸对照液 阿司匹林 ↓硫酸铁铵 对照液颜色 供试液颜色 实验原理 比色法： 合格 +Fe3++H2O Fe OH 紫堇色 2010版用HPLC法 实验步骤 1、样品前处理 取本品30片（0.025g/片），研细，用乙醇15ml分次研磨，并移入50ml量瓶中，充分振摇，用水稀释至刻度，摇匀，立即滤过，取续滤液。 2.00mL续滤液 水稀释至50mL 3mL硫酸铁铵 4.50mL0.01%水杨酸标液 3mL 乙醇 1.00mL酒石酸溶液 水稀释至50mL 3mL硫酸铁铵 50ml纳氏比色管 比较颜色，不得更深（1.5%） 样品管 对照管 1. 在阿司匹林中游离水杨酸的检查中，制备供试品溶液所用的比色管须经干燥后使用，且供试品须用乙醇溶解后才可加水稀释至刻度，否则供试品难以溶解。 2. 游离水杨酸检查时，供试品溶液要临用现配，避免阿司匹林水解造成的误差。 3. 进行水杨酸检查时，应在中性或弱酸性溶液（pH4~6）中进行。若在强酸性溶液中，生成的紫兰色配合物会分解褪色。 注意事项： 二、氢化可的松中有关物质的检查 氢化可的松 天然皮质激素 甾体激素中的有关物质： 1、杂质来源 原料、中间体、异构体、降解产物 2、特点 （1）可能存在多个甾体杂质 （2）结构类似 本实验中，氢化可的松中“其他甾体” 的检查采用TLC法（自身稀释对照法）。 2010版用HPLC法 实验原理 供试品溶液所显杂质斑点颜色不得深于对照溶液的主斑点 方法： 供试品溶液 对照溶液 杂质 主药 不合格 杂质 四氮唑比色法： 肾上腺皮质激素药物 四氮唑盐 OHˉ 紫色斑点 实验步骤 供试品溶液和对照品溶液的制备 取本品，加氯仿-甲醇（9:1）制成每1ml中含3.0mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取适量，加氯仿-甲醇（9:1）制成每1ml中含60mg的溶液，作为对照品溶液。 2. 检查 吸取上述两种溶液各5μl （毛细管高度约1.5cm）， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水（385：60：30：2）为展开剂，展开后，晾干，在105℃干燥10min，放冷，喷以碱性四氮唑蓝试液，立即检视。供试品溶液如显杂质斑点，不得多于3个，其颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 三、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查 1、杂质来源： 水解产生对氨基苯甲酸，进一步脱羧、氧化成有色杂质，使注射剂颜色变黄、疗效下降、毒性增加。 检查方法 ： TLC法（杂质对照法） 1、杂质对照法： 对照品：对氨基苯甲酸 供试品：盐酸普鲁卡因 薄层板：硅胶H板 展开剂：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4） 显色剂：对二甲氨基苯甲醛 杂质斑点与对照品主斑点比较，不得更深。 供试品 杂质对照品 杂质 主药 合格 实验原理 2010版用HPLC法 杂质已知且有杂质对照品 实验步骤 吸取盐酸普鲁卡因供试液和对氨基苯甲酸对照液各10μl（毛细管高度约2.0cm），分别点于同一含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上。以苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4）为展开剂，展开后，晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2%对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加入冰醋酸5ml制成）喷雾显色，供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 *