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第一部分 微生物培养技术实验一培养基（medium, media, culture media）的制备实验一 培养基的制备技术1.前期准备:1）确定和选择配方-MSM; LB细菌—真菌—放线菌—实验一 培养基的制备技术培养基（medium, media, culture media）的制备1.前期准备:2）准备试剂, 器皿和设备等；①常用试剂等材料: 基本试剂: 牛肉膏；蛋白胨；琼脂；NaCl；pH试纸；HCl和 NaCl调整pH使用商品化干燥培养基：营养琼脂，细菌培养基等② 玻璃器皿等试管；锥瓶；烧杯；培养皿；量筒；玻棒；漏斗；铁支架；自制棉塞（纱布，棉花，线）；角匙；标签纸或者记号笔；牛皮纸(或者报纸)；锅（配置培养基，处理污染物等）；火柴(打火机)；接种环；③ 仪器等天平; 电炉（电磁炉）；高压蒸汽灭菌器(锅)；电烘箱（干热灭菌箱）；培养箱（后期培养时使用）；恒温水浴箱（培养基恒温）等；实验一 培养基的制备技术2.基本流程(1)自行配置培养基按照配方称取药品↓调pH pH7.2-7.4;用NaOH ↓分装 按照规定量装入容器，例如试管，三角瓶，加棉塞(自己做）↓ 包扎 牛皮纸（报纸等），线绳，橡皮筋等 ↓ 灭 菌 ↓ 分装到培养皿、试管、小三角瓶↓摆斜面（试管） ↓无菌检查/存放备用　实验一 培养基的制备技术3灭菌1）高压蒸汽灭菌器(锅)； 适用范围：配置的培养基，制备无菌水等的灭菌；使用条件: 恒温121.3℃，维持20min;注意事项：高压容器注意安全操作；开始检查水位和密封圈；升至100 ℃，关掉出气阀门。实验一 培养基的制备技术3灭菌2）干热灭菌（电烘箱）；适用范围; 玻璃器皿耐热物体的灭菌; 使用条件: 恒温160℃，维持2hr; 恒温170℃, 维持1hr注意事项：高温设备，注意安全操作；实验一 培养基的制备技术4 分装倒平板过程： 制备固体培养基；培养基冷却到约50℃倒平板持皿法：叠皿法：实验一 培养基的制备技术4 分装液体培养分装过程： 制备培养基；培养基冷却到约50℃分装到小三角瓶第一部分 微生物培养技术实验二接种和培养 （inoculation and cultivation)试验前液体接种液培养：3个菌种，每种1瓶，1瓶3菌种种混合。每组一瓶；（共4个组，每组5个人）培养基准备：MSM培养基。每人2个培养皿（固体培养），2个三角瓶（液培）（上个实验已经准备好的）具体工作：给液体和固体培养基接种每天测定—镜检，OD值测定产出：菌种生长曲线（细菌个数，OD值）实验二 接种和培养1、平板培养接种1）平板划线(streak plate)；使用材料和用具：培养皿、酒精灯、接种环等：实验二接种和培养2）稀释涂布平板法(spread plate)：使用材料和用具：培养皿、酒精灯、涂布器（玻棒制作）等：实验二 接种和培养3）倒平板法用于菌浓度稀释的方法之一实验二 接种和培养2、液体培养接种1）菌块接种从平板培养中切下菌斑，放入三角瓶中2）孢子悬浮液接种实验二 接种和培养3、培养方法---impossible is nothing. 试管(斜面)-静至于冰箱；用于菌种保存 培养皿（平板）-静至于一定温度； 实验二 接种和培养3、培养方法---impossible is nothing. 锥瓶（液体培养基）-震荡，一定温度；。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。