紫外分光光度计UltravioletSpectrophotometryUV.ppt

* （二）化学因素 1、溶液浓度过高引起的偏离 浓度过高，吸光质点间的平均距离减小，由于 相互作用而使吸光物质的电荷分布发生变化，从而 改变物质的吸光能力，即改变物质的摩尔吸光系数 2、化学反应引起的偏离 高浓度的电解质溶液对低浓度的吸光物质 有时也会产生类似影响，应尽量避免。 M c1 c2 c3 c4 第二节 化合物的紫外-可见吸收光谱 一、有机物的UV-vis光谱 1.电子跃迁的类型 2.常用术语：生色团和助色团 3.影响紫外-可见吸收光谱的因素： 共轭效应、溶剂效应、溶液pH * 二、无机物的UV-vis光谱 * 第三节UV-vis分光光度计的结构与原理 * 分光光度计的组 成 结 构 * 光源 单色器 吸收池 检测器 信号处理及 显示系统 * 氙灯 氢灯 钨灯 1.光源 分光光度计对光源的要求：光源应能提供足够发射强度、稳定且波长连续变化的复合光，同时光源的强度还应不随波长的变化而明显改变 钨灯：400～2500nm 氢灯or氘灯：185～375nm 氙灯：200～800nm 2.单色器monochromator * 作用：从光源发出的复合光中分出所需要的单色光 组成：入射狭缝、准直镜、色散元件（棱镜或光栅）、聚焦镜、出射狭缝 入射狭缝 准直透镜 棱镜 聚焦透镜 出射狭缝 白光 红 紫 λ1 λ2 800 600 500 400 1.棱镜单色器 3.吸收池 比色皿有两种：玻璃和石英 规格 使用比色皿就特别注意保护两个光学面， * 4.检测器 光电管和光电倍增管 * 1 ） 光电管 当阴极受到适当波长的光线照射时便发射电子， 电子被带正电位的阳极所吸引，在光电管内就有电子流，在外电路中便产生了电流。 5.信号显示系统 * 2 ）光电倍增管 在入射光极为微弱时，光电管能产生的光电流就很小， 光电倍增管：放大光电流 组成：光电阴极+若干倍增极+阳极 可应用于定性分析、定量分析和物质的某些物理化学常数的测量。 一、定性分析 依据物质的吸收光谱特征： 吸收曲线的形状 最大吸收波长 摩尔吸收系数 * 第四节 分光光度法的应用 * 二、定量分析 （一）单组分的测定 1、一般方法（标准曲线法） 0 1.0 2.0 3.0 4.0 c(mmol/L) A 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00 Ax cx M c1 c2 c3 c4 cx 【例1-4，1-5】 第五节 实验技术 一、样品的制备 二、仪器测量条件的选择 * * 1.显色反应和显色剂 显色反应：在分光光度分析中，将试样中被测组分转变成有色化合物的反应 显色剂：与被测组分反应使之生成有色物质的试剂 显色反应可分为：络合反应和氧化还原反应 三、显色反应条件及其影响因素 * 选择显色反应的一般原则： b.选择性要好：一种显色剂最好只与一种被测组分起显色反应，这样干扰就少。或者干扰离子容易被消除、或者显色剂与被测组分和干扰离子生成的有色化合物的吸收峰相隔较远 a.灵敏度要高：灵敏度高的显色反应对于微量组分的测定尤为重要。 e.显色反应的条件要易于控制 d.有色化合物的组成要恒定,化学性质要稳定 c.对比度要大：即如果显色剂有颜色，则有色化合物与显色剂的最大吸收波长的差别要大，一般要求在60nm以上 * 显色剂 缺点：多数无机显色剂与金属离子形成的络合物的稳定性差、灵敏度和选择性都不高 （1）无机显色剂 硫氰酸盐（测铁、钼、钨、铌） 钼酸铵（测硅、磷、钒） 氨水（测铜、钴、镍） 过氧化氢（测钛、钒、铌） * 优点：有机显色剂与金属离子形成稳定的、具有特征颜色的鳌合物，灵敏度和选择性都较高 （2）有机显色剂 提高灵敏度的方法：增大有机显色分子的共轭体系和在显色分子中引入取代基 生色团 助色团 常用的有机显色剂：邻二氮菲、双硫腙、二甲酚 橙、偶氮胂III、铬天青S等 * 2、显色剂的用量 具体要用实验来确定 * 3、溶液的酸度控制 （1）对被测物质存在状态的影响 （2）对显色剂浓度和颜色的影响 （3）对络合物组成和颜色的影响 （吡啶偶氮+氨基甲苯） pH=4~9 1:2(棕褐色) * 25℃ 100℃ t /min A 4、温度和时间 100℃ 硅钼酸法测硅 时间包括显色时间和稳定时间，温度对二者均产生影响 * 5、溶剂 有机溶剂可以降低有色络合物的解离度， 从而提高显色反应的灵敏度；此外，有机溶剂还可以影响反应速率，络合物的颜色、溶解度及组成等。 可以提高方法灵敏度和选择性。 * 四、参比溶液的选择 参比溶液用来调节工作零点，以消除由于吸收池和溶液中某些共存物质对光的吸收、反射或散射所造成的误