化妆品中17种着色剂的测定高效液相色谱法-浙江保健品化妆品.docVIP

- 附件7： 化妆品中7种染发剂的检测方法 （征求意见稿） 1 适用范围 本方法规定了化妆品中酸性紫43（CAS：224-618-7，CI 42510 ）；碱性紫14（CAS：632-99-5，CI42510）；酸性橙3（CAS：228-921-5）；碱性黄87（CAS：116844-55-4）；碱性蓝26（CAS：2580-56-5，CI44045）；碱性红51（CAS：12270-25-6）；碱性橙31（CAS：97404-02-9）7种染发剂含量的高效液相色谱测定方法。 本方法适用于染发类和烫发类化妆品中碱性红51、碱性紫14、酸性紫43、碱性蓝26、碱性橙31、酸性橙3、碱性黄87等7种染发剂含量的测定。 2方法提要 试样经甲醇超声提取后，过0.45μm滤膜，采用高效液相色谱系统分离，紫外检测器或二极管阵列检测器进行检测，外标法定量。若取5.0g样品，本方法对碱性红51、碱性紫14的检出限为0.06mg/kg；酸性紫43、碱性蓝26的检出限为0.6mg/kg；碱性橙31、酸性橙3的检出限为1.2mg/kg；碱性黄87的检出限为3.0mg/kg；最低定量浓度分别为：碱性红51、碱性紫14：0.2mg/kg、酸性紫43、碱性蓝26为2.0mg/kg；碱性橙31、酸性橙3为3.5mg/kg；碱性黄87为10mg/kg。 3试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为一级水。 3.1 甲醇。 3.2 四氢呋喃。 3.3 乙酸铵：分析纯。 3.4 乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取1.54 g乙酸铵（3.3），加水至1000 mL，溶解，经0.45μm滤膜过滤。 3.5 染发剂标准物质：酸性紫43（Acid Violet 43，CAS：224-618-7，CI 42510 ）；碱性紫14（Basic Violet 14，CAS：632-99-5，CI42510）；酸性橙3（Acid Orange 3，CAS：228-921-5）；碱性黄87（Basic yellow 87 ，CAS：116844-55-4）；碱性蓝26（Basic Blue 26，CAS：2580-56-5，CI44045）；碱性红51（Basic red 51，CAS：12270-25-6）；碱性橙31（Basic orange 31，CAS：97404-02-9）；纯度均≥90%。 3.6 染发剂混合标准储备液（1.0 mg/mL）：分别称取7种染发剂标准物质（3.5）0.1 g（精确至0.1mg）于100 mL容量瓶中，甲醇（3.1）稀释定容。 3.7 染发剂混合标准系列溶液：分别移取一定量的2种染发剂（酸性紫43；碱性紫14）标准储备液（3.6），用甲醇配制成浓度为5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0μg/mL的标准系列溶液；分别移取一定量的5种染发剂（酸性橙3；碱性黄87；碱性蓝26；碱性红51；碱性橙31）标准储备液（3.6），用甲醇配制成浓度为1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μg/mL的标准系列溶液。 4仪器与设备 4.1 高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器。 4.2 分析天平：感量分别为0.1 mg和1.0 mg。 4.3 超声波清洗器。 4.4 涡旋混匀器。 4.5 有机微孔滤膜：0.45μm。 5分析步骤 5.1 样品预处理 准确称取试样5.0g（精确至1mg）于25ml比色管中，加入1.0 ml四氢呋喃（3.2），再加入20ml甲醇（3.1），涡旋振荡2min，在超声提取30min后，放置至室温，用甲醇（3.1）定容，摇匀，过0.45μm滤膜，待测。 5.2色谱参考条件 色谱柱：C18柱，250mm×4.6mm（内径），5μm；或相当者。 流动相：A相（甲醇）+B相（0.02mol/L乙酸铵（pH=4.0）），梯度洗脱程序见表1。 流速：1.0 mL/min 柱温：30 进样量：10μL 检测器：紫外检测器或二极管阵列检测器 检测波长：碱性蓝26为616 nm；碱性红51、碱性紫14、酸性紫43为520 nm；碱性橙31、碱性黄87、酸性橙3为480 nm。 表1 梯度洗脱程序 时间，min 流动相A（%） 流动相B（%） 0 5 95 10 30 70 25 80 20 35 80 20 5.3 测定 本方法采用外标校准曲线法定量测定。以系列标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，作标准曲线线性回归方程，以试样的峰面积与标准曲线比较定量。 6 计算 试样中染发剂的含量（μg/g），按式（1）计算： ……………………. ……………(1) 式中：w—试样中染发剂的含量，μg/g； C—试样溶液中染发剂的含量，μg/mL； V—提取溶液体积，mL； m