转基因植物生物安全标记基因.pdf

中　国　生 　物 　工 　程 　杂 　志 第 23 卷第 4 期 CHINA BIOTECHNOLOGY 2003 年 4 月 转基因植物生物安全标记基因 王兴春 　杨长登 ( 中国水稻研究所农业部水稻生物学重点实验室 　杭州 　310006) 摘要 　在大量转基因植物被推向市场的同时 ,人们对转基因植物对环境及人类健康等许多方面 可能存在的风险感到担扰 。标记基因的生物安全性成为人们普遍关注的问题之一 。新的标记基 因不仅要求能够对转基因植物进行筛选和鉴定 ,而且必须对环境和生物都是安全的。概述并评 价了绿色荧光蛋白基因、核糖醇操纵子 、6磷酸甘露糖异构酶基因、木糖异构酶基因以及谷氨酸 1半醛转氨酶基因等生物安全标记基因及其最新研究进展 。 关键词 　基因工程 　转基因植物 　生物安全 　标记基因 ( ) ( ) 　　自从 1983 年第一株转基因植物诞生以来 ,全 rtl 、6磷酸甘露糖异构酶基因 p mi 、木糖异构酶 ( ) ( ) 球抗虫 、抗病 、抗除草剂和品质改 良的棉花 、水稻 、 基因 xy lA 和谷氨酸1半醛转氨酶基因 hemL 大豆 、玉米等转基因植物已达 120 多种 ,种植面积 等 。与常规标记基因不同,这些标记基因没有抗生 4700 多万 ha 。为了加快作物遗传改 良的进程 ,将 素或除草剂抗性 ,相对来说对生物是安全的 , 因此 外源 目的基因导入植物体 ,并筛选出极少量的转化 被称为生物安全标记基因。 细胞 ,一套高效安全的选择方法极为重要 。到 目前 1 　绿色荧光蛋白基因( GFP) 为止被广泛用于选择的标记基因主要有两大类 :一 ( ) 1962 年 Shimomura 等 首 次 从 多 管 水 母 属 类是抗生素类 ,包括潮霉素磷酸转移酶基因 hp t 、 ( ) (A equorea victoria) 中分离纯化出一种荧光物质 ,并 新霉素磷酸转移酶基因 np t 、卡那霉素抗性基因 ( ) ( np t Ⅱ 等 ; 另一类是抗 除草剂类 , 包括草丁膦 将其定性为蛋 白质 , 称之为绿色荧光蛋 白 green ( ) ( ) ( ) fluorescent proteins , GFPs) 。目前研究得较为深入的 glufosinate 抗性基因 bar 、草甘膦 glufosinate 抗 ( ) ( ) 性基因 epsps 等 。这些存在于转基因植物中的具 是来自多管水母科 Aequorea 的 GFP 即 AGFP ,它 有抗生素或除草剂抗性的标记基因是否会对环境 是由238 个氨基酸组成的单体 ,分子量约为 27kD 。 及人类健康有不 良影响和损害引起了广泛关注 。 该 GFP 在 395nm 和 470nm 处具有吸收高峰 。目前 这些问题主要集中在 : ( 1) 抗生素抗性基因会不会 有关 GFP 发光的机理还不太清楚 ,较普遍赞同的 转移到微生物中 ,使病原菌获得抗性 ,从而导致 目