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第4课时 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 第二部分 酶的应用 考试要求 知识内容 考试属性及要求 考情解读 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 加试 1.尝试用吸附法制作固定化α-淀粉酶。 2.运用固定化α-淀粉酶进行淀粉水解的测定。 3.说明酶固定化的方法及制作原理。 4.通过此实验探讨固定化酶的应用价值。 一、固定化技术的基础知识 二、α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测实验 内容索引 当堂检测 一、固定化技术的基础知识 基础梳理 1.酶:酶是生物体内各种 的催化剂,它有高度的 性和 性。 2.固定化酶:将 的酶用 的方法固定在 上,使之成为 而又有 的制剂。 3.将酶改造成固定化酶的原因:酶在水溶液中 ,且不利于______ 使用。 4.酶固定化的方法有: 法、 法、 法和共价偶联法。教材实验中用的是 法。 化学反应 专一 高效 水溶性 物理或化学 某种介质 不溶于水 酶活性 很不稳定 工业化 吸附 包埋 交联 吸附 5.固定化酶作用的机理(如图):将固定化酶装柱,当甲 经过该柱时,在 的作用下转变为乙 。 底物 酶 产物 问题探究 1.固定化酶的优点是什么? 答案 固定化酶能够连续使用,但不是永久使用。酶是具有生物活性的大分子,因此随着使用次数的增多,酶活性也会降低,如果酶活性降低到一定程度,就会失去使用价值。 答案 答案 2.根据图示连接固定化技术与原理 答案 3.下列所示的酶固定化技术中属于包埋法的是 。 ③④ 活学活用 1.关于固定化酶技术的说法,正确的是 A.固定化酶技术就是固定反应物,并将酶依附着载体围绕反应物旋转的 技术 B.固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应 C.固定化酶中的酶无法重复利用 D.固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术 答案 解析 解析 固定化酶技术就是将水溶性的酶利用物理或化学方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂,其优点是酶被固定在一定装置内可以重复利用,缺点是无法同时催化一系列酶促反应;在固定过程中,固定的是酶而不是反应物,因此A、B、C项均错误。 一题多变 判断正误: (1)固定化酶可反复永久使用( ) (2)不管是固定化酶柱还是固定化悬浮体,回收后,在一定条件下贮存,还可以利用( ) (3)酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定化( ) (4)固定化酶可催化一系列的酶促反应( ) 答案 × √ √ × 题后反思 直接使用酶和固定化酶的比较 项目 直接使用酶 固定化酶 制作方法 - 吸附法、共价偶联法、交联法、 包埋法等 是否需要营养物质 否 否 酶的种类 一种或多种 一种 催化反应 单一或多种 单一 反应底物 各种物质(大分子、小分子) 各种物质(大分子、小分子) 缺点 对环境条件非常敏感,易失活;难回收,成本高,可能影响产品质量 不利于催化一系列反应 优点 催化效率高、耗能低、低污染 既能与反应底物接触,又能与产物分离;可以重复使用;可提高酶的热稳定性 二、α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用 的检测实验 基础梳理 1.α-淀粉酶的固定化 (1)α-淀粉酶作用的最适条件:最适pH为 ;最适温度为 。 (2)方法: 法,将α-淀粉酶固定在 上。 (3)淀粉的水解作用 淀粉 葡萄糖 遇碘显蓝色 遇碘显红色 遇碘不显色 5.5~7.5 50~75 ℃ 吸附 石英砂 糊精 麦芽糖 2.淀粉水解的测定实验 固定α-淀粉酶→滴管滴加淀粉溶液→加 溶液→观察→ → 几天后重复实验。 3.实验步骤 固定化α-淀粉酶,装入注射器中 ↓ 以0.3 mL/min的流速滴加 过柱 ↓ 流出5 mL淀粉溶液后接收0.5 mL流出液 ↓ KI-I2 洗涤 淀粉溶液 滴加 溶液,观察颜色,稀释1倍后再观察颜色 ↓ 以1
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