第三章核酸的发现和研究工作进展.pptVIP

第 三 章核酸 （Nucleic Acid） 核酸的发现和研究工作进展 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1961年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 1985年 Mullis发明PCR 技术 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 2003年 完成人类基因组测序工作 核酸的化学组成 DNA的结构 RNA的结构 核酸的理化性质 一、核酸的化学组成 核 苷：碱基+戊糖，糖苷键 体内重要的游离核苷酸及其衍生物 含核苷酸的生物活性物质： NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP 腺苷酸及其多磷酸化合物 三、核酸的一级结构 定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 一、 DNA 的一级结构 1953年Watson 和Crick提出了DNA的双螺旋结构模型 获1962年诺贝尔生理学与医学奖 Molarity of Bases DNA的双螺旋结构的意义 The supercoil DNA The DNA in a prokaryotic cell is a supercoil. （二）DNA与蛋白质复合物的结构 RNA的一级结构 一、mRNA的结构与功能 真核细胞mRNA的结构特点 * tRNA的一级结构特点 含 10~20% 稀有碱基，如 DHU 3′末端为 — CCA-OH 具有 T?C 解链曲线：在连续加热DNA的过程中，以温度对A260值作图，所得的曲线称为解链曲线。 Tm：紫外吸收值达到最大值的一半时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(melting temperature, Tm)。其大小与G+C含量成正比。 二、核酸的变性(denaturation)与复性 （一）变性 在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 DNA变性的本质是双链间氢键的断裂。 目 录 使DNA变性的方法：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。 DNA变性后理化性质的变化： A260增高；生物活性丧失 目 录 例：变性引起紫外吸收值的改变 DNA的紫外吸收光谱 增色效应：DNA变性时其溶液A260增高的现象。 目 录 目 录 （二） DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953） 氢键维持双链横向稳定性 疏水性碱基堆积力维持双链纵向稳定性（主要）。 目 录 （三）DNA双螺旋结构的多样性 目 录 左手螺旋 相对湿度92%的DNA纤维 相对湿度75%以下的DNA纤维 该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征，最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA复制、转录和反转录的分子基础，亦是遗传信息传递和表达的分子基础。 该模型的提出是20世纪生命科学的重大突破之一，它奠定了生物化学和分子生物学乃至整个生命科学飞速发展的基石。 三、DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装 （一）DNA的超螺旋结构 超螺旋结构(superhelix 或supercoil) DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。 正超螺旋(positive supercoil) 盘绕方向与DNA双螺旋方同相同 负超螺旋(negative supercoil) 盘绕方向与DNA双螺旋方向相反 意义 DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具有关键作用。 The E. Coli chromosome consists of 4.64×106 bp. The length of DNA forming E. Coli chromosome is over 1.6×106 nm (1.6 mm). But the long dimension of E. Coli is only 0.002 mm. Supercoiling makes the DNA molecule more compact thus important for its packaging in cells. Eukaryotic DNA Haploid human genomes (contained in egg and sperm cells) consist of 3×109 bp, while diploid genomes (found in somatic cells) have t