湖南永州地区瑶汉民族慢性胃炎、胃溃疡患者中HpcagA、vacA表达的相关性研究.docVIP

湖南永州地区瑶汉民族慢性胃炎、胃溃疡患者中HpcagA、vacA表达的相关性研究 永州市职业技术学院附属医院消化内科425100 摘要：目的：研究湖南永州地区汉、瑶族慢性胃炎、胃溃疡患者屮表达cagA. vacA基因的幽门螺杆菌感染情况及与慢性胃炎、胃溃疡疾病的相关性。方法： 收集2013年月至2014年1月胃镜诊断为慢性胃炎、胃溃疡的患者，汉瑶民 族各50例。对快速尿素酶试验及14C呼气实验联合确诊为幽门螺杆菌感染的患 者取胃粘膜进行PCR扩增检测cagA、vacA基因。结果：100例慢性胃炎、胃溃 疡的瑶汉族患者屮，Hp阳性率为82% (82/100),其屮汉族人群Hp阳性率为78% (39/50),瑶族人群为86% (43/50),汉、瑶民族Hp阳性率无明显统计学差异 (Pgt；0.05)o cagA阳性率是82.9% (68/82), Hp cagA的表达在汉、瑶民族之间, 在慢性胃炎、胃溃疡患者Z间均无统计学差异(Pgt;0?05)。vacA阳性率为100% (82/82),检测出sla/mlb、sla/m2 s2/m2三种组合，各亚型所占的比例分别 为 53.7% (44/82)、34.1% (28/82)、12.2% (10/82)o 其中 Hp vacA sla/mlb 在慢 性胃炎屮的表达高于胃溃疡(Plt;0.05), vacAsla/m2在胃溃疡中的表达高于慢 性胃炎(Plt;0.05)； HpvacA基因各亚型在湖南永州地区汉、瑶民族Z间的分布 差异无统计学意义(Pgt；0.05)o结论:1、湖南永州地区汉瑶民族、慢性胃炎、 胃溃疡患者感染Hp后以cagA+, vacA sla/mlb+亚型占优势。2、Hp vacA sla/mlb 与慢性胃炎关系更为密切，HpvacAsla/m2与胃溃疡关系更为密切；3、未发现 Hp cagA vacA基因与湖南永州地区汉瑶民族具有相关性。 关键词：幽门螺杆菌；cagA基因；vacA基因；慢性胃炎；胃溃疡 幽门螺杆菌(Helicobacterpylori, Hp)与慢性胃炎、胃溃疡的发生密 切相关，其中细胞毒素相关基因A (Cytotoxin-associated gene A, cagA) [1]和 空泡细胞毒素（vacuolating cytotoxin A, vacA） vacA基因【2】是Hp的两个重要 毒力因子。不是所有的Hp都含有cagA,它存在于Hp高毒力菌株中，表达产物 为CagA蛋白【3】。所有的Hp菌株都含有vacA基因，但只有约50%~60%能表 达有活性的VacA蛋白对宿主细胞产生多种毒性作用。国外研究提出不同的Hp 菌株所产生的菌株毒力差异是导致不同疾病类型的主要原因。Hp菌株具有多样 性，不同的地域、不同的民族之间所感染的Hp菌株类型可能存在差异。许海峰 在研究Hp cagAx vacA基因在汉族与维吾尔人群中的特异性中发现vacA m2在维 吾尔族人群中检出率显著于汉族，vacA mlb在汉族人群中的检出率显著于维吾 尔族，提示Hp cagA. vacA基因可能存在民族差异性。本实验基于永州江华县是 瑶族人群的聚集地，有充足的瑶族人群研究标本，采取聚合酶连反应技术（PCR） 研究Hp cagA vacA基因在湖南永州瑶汉民族慢性胃炎、胃溃疡患者中的表达, 探讨HpcagA.vacA基因的民族表达差异性及与慢性胃炎、胃溃疡疾病的相关性。 1材料和方法 1.1 一般资料：随机收集于2013年11月?2014年1月在永州市职业技 术学院附属医院（收集汉族病例）、江华瑶族自治县人民医院（收集瑶族病例） 胃镜室因上腹部不适接受胃镜检查的慢性胃炎、胃溃疡患者的胃粘膜标本100 例，其中瑶汉民族各50例。男56例，女44例，年龄45-60岁,平均54.3 士 2岁， 两组间年龄、性别等一般资料对比差异不显著。纳入标准：（1）、研究对象均为 在永州出生并长大，父母三代同为汉族或同为瑶族、既往无重大基础疾病的患者。 （2）、所有的研究对象均确保在实验开始前3个月内未曾服用过钮剂、质子泵抑 制剂、抗酸剂、非當体类抗炎药及抗生素等药物。（3）、胃镜及病理诊断为慢性 非萎缩性胃炎、胃溃疡。 1.2主要试剂及仪器：细菌基因组DNA快速抽提试剂盒、组织基因组 DNA快速抽提试剂盒、Hp国际标准菌株NCTC11637 （vacAsla/m2, cagA+）、PCR 扩增试剂盒（上海生工生物制剂有限公司）、Biometra T Grandient热循环仪 （Hettich 公司）。 1.3方法：（1）采取14C呼气试验及胃窦黏膜组织快速尿素酶检测两 种诊断方法，均阳性者认为Hp感染。(2)采取上海生物工程公司提供的组织基 因组DNA快速抽提试剂盒及细菌基因组DNA快速