中图版生物必修1第二节《细胞的凋亡》.ppt

Tunel反应：探针＋靶核酸 DNA-DNA 为间接法 杂交体 探针 半抗原标记物 标记探针 靶核酸 杂交体 酶标特异性抗体 显色 间接法原位杂交示意图 DAB 镜下控制 显色 水洗 75％酒精 85％酒精 95％酒精 无水酒精 （Tunel检测法） 灌注固定大鼠肝，Tunel反应阳性，DAB显色，血管内无红细胞背景染色。×125 非灌注固定大鼠肝，Tunel反应阳性，肝细胞核BCIP/NBT显色呈紫黑色，血管内红细胞呈桃红色。 ×250 RNA酶(RNase)保护实验 这种高度敏感的实验技术来源于对某些噬菌体的DNA依赖性RNA聚合酶的研究， 这种酶是从DNA模板上合成高度特异性RNA探针的理想工具， 用来检测和定量研究mRNA。这样， cDNA片断可以被克隆到含有噬菌体引物的质粒中， 并可用来合成放射性标记的反义RNA探针。 应用人类凋亡模板试剂盒中32P标记的反义RNA探针与从标本中分离的RNA 杂交， 再行RNA酶处理。最后用放射自显影或吸光度分析法分析翻译产物。此实验的优点是敏感性高， 可在一份总的RNA 标本中同时定性不同种类的mRNA 用RT-PCR 方法进行mRNA 的半定量分析 提取细胞的RNA ， 与逆转录酶、