依达拉奉对脑血栓形成大鼠的脑保护作用.pdfVIP

·正文· 刖 置 脑血管疾病是一种世界性的疾病，具有高发病率、高死亡率、高致残率的特点，是现 今人类死亡率最高的三大疾病之一，其中脑梗死的发生率竞高达80％，在我国脑血管病发病 人数仍在逐年增加。人们对于急性缺血性脑血管病的发病机制研究已久，急性脑梗死病灶 由中心坏死区及周围的缺血半暗带组成。半暗带由于存在侧枝循环，尚有大量可存活的神 经元，尽快恢复血供、保护这些可逆性损伤的神经元是脑梗死的治疗关键。目前缺血性脑 血管病急性期治疗主要集中于恢复脑组织的供血供氧，促进神经功能恢复。用于治疗的药 物有：溶栓剂、抗凝剂、抗血小板剂、自由基清除剂和神经保护剂等。目前临床上常用的 自由基清除剂如维生素类、糖皮质激素、谷胱甘肽、辅酶QIO等疗效不显著，特另Ⅱ对缺血 性脑血管病急性期的疗效较差，临床上仍缺乏疗效确切且被广泛认可的脑保护剂。依达拉 活性的抗氧化剂。体内外研究结果表明，依达拉奉具有消除自由基和抑制脂质过氧化作用， 可抑制脑细胞(血管内皮细胞、神经细胞)的过氧化作用，从而减轻脑缺血和脑缺血引起 的脑水肿及组织损伤，用于急性脑梗死的治疗。磷脂酸是脑细胞缺血缺氧后激活磷脂酶D 水解磷脂酰胆碱产生的一种脂质第二信使【“，PA的水平可反映脑缺血缺氧的程度。本实验 通过建立大鼠脑血栓形成模型并预防性给予依达拉奉，观察了大鼠脑血栓形成后行为障碍 评分、血浆PA水平和脑组织含水量的变化以及依达拉奉对上述指标的影响，探讨依达拉 奉的神经保护作用。 山西嚣辫大学硬士学位论文 材料与方法 1实验材料 验动物中心提供。 1．2主要药品、试剂及仪器 1．依达拉奉注射液(商品名；必存)购自上海先声药业有限公司，规格为lOmg，批号： 040283。 3．HE染色所需试剂，山西医科大学病理学教研室提供。 4．PA测定试剂，购自中国科学院泰福仕科技开发有限公司。 5．UV一754紫外分光光度计，上海精密科学仪器有限公司。 6．LD4_-2A医用离心机，北京医用离心机厂。 7．必要手术器械。 8．导管(经处理后的硬膜外麻醉管)。 9．50“l微量进样器。 10．OLYMPUS．CX40RF200型光镜。 11．120C电热恒温箱，宁波自动化仪表研究所。 12．光学读数分析天平(TG328B)，湘仪天平仪器厂。 13．其余普通试剂及仪器由山西医科大学研究生实验室提供。 2实验方法 2．1大鼠脑血栓形成模型的建立方法 本实验动物模型，参照张兆岩【3】的方法并加以简化改进建立大鼠脑血栓形成模型。 1．术前禁饮食12h。 部纵向切开皮肤，切口约2．5cra，分离颈部肌肉，游离出右侧颈总动脉，从CCA分叉处向 上分离右颈外动脉和右颈内动脉。结扎ECA，然后向颅底方向分离ICA，在颅底小心分离 出翼腭动脉并结扎其根部，仅保留ICA入颅底主干。 3．诱导血栓形成：暂时用2只微型动脉夹间隔一定距离夹闭ICA，在近心端血管夹下方 固定后，移去近心端血管夹，使少量血液流入导管头端，放置约10rain使之形成一小的栓 子，然后移去远心端血管夹，将此栓子和凝血酶缓慢注入ICA，最后拔出导管，并将CCA 切口处结扎，依次缝合分离的肌肉、皮下组织和皮肤。 4．术后均单笼饲养。 2 2．2实验分组 腹腔注射麻醉。 I：正常对照组(12只)，进行行为障碍评分，随机选取6只麻醉后直接采血检测PA并同 时取脑作病理切片；剩余6只测脑组织含水量。 II：假手术组(12只)，参照上述方法制作模型，但颈内动脉插管中不注入血栓栓子和凝 血酶，仅注入等量生理盐水；随机选取6只于术后3h进行行为障碍评分，并再次麻醉， 采血检测PA，取脑作病理切片；剩余的6只于术后3h进行行为障碍评分，并再次麻醉， 断头取脑测脑组织含水量。 行为障碍评分，并再次麻醉，采血检测PA，取脑作病理切片；剩余的6只于术后3h进行 行为障碍评分，并再次麻醉，断头取脑测脑组织含水量。 余过程同脑缺血组； 过程同脑缺血组。 2．3神经行为学评分标准(参考Bederson等【4l的方法1 1．提鼠尾离开地面30cm，观察前肢屈曲情况，如双前肢对称伸向地面，计为0分。如手 术对侧前肢出现腕屈曲、肘屈曲、肩内旋或既有腕、肘的屈曲又有肩内旋者，分别计为1， 2，3和4分。 2．将