分子水平上的基因功能下.pptVIP

2.　DNA超螺旋结构的影响 　　双链DNA分子的两条链绕轴卷曲成双螺旋（二级结构），然后双螺旋再卷曲成超螺旋（三级结构），超螺旋还可以卷曲成更高级的结构。体外实验表明，只有把DNA卷曲成超螺旋才可能进行复制和转录。其中复制受超螺旋程度的影响不大，复制酶不管模板的超螺旋松紧度如何都可进行正常复制，而转录却不同，转录极易受到超螺旋松紧程度的影响。 3.　DNA甲基化对基因表达的影响 　　甲基化(methylation)是在甲基化酶(methylase)的作用下，将一个甲基添加到DNA分子中的碱基上，最常见的是胞嘧啶甲基化形成5-甲基胞嘧啶，用mC表示。真核生物DNA中大约20-70%的胞嘧啶存在着甲基化修饰。甲基化多发生在CG二核苷酸对上，分半甲基化5‘mCpG3’/3‘GpC5’，和完全甲基化5‘mCpG3’/3‘GpCm5’两种。使用某些II型限制性内切酶可以研究DNA序列的甲基化状况，如HpaII识别并切割未甲基化的CCGG(CˉCGG)，而MspI识别无论是否甲基化的CCGG，切割后的片段分别进行电泳，即可鉴定这些CCGG序列是否甲基化。 用限制性内切酶鉴定CCGG序列是否甲基化。数字为酶切后的DNA片段编号 5.8.3.2　调控序列和调控蛋白对基因表达调控的影响 真核细胞的一个基因调控区(gene control region)包括启动子及对其调控的所有的调控序列(regulatory sequence)。这些调控序列距离启动子或远或近，多数在基因的上游，也有的在下游。在高等真核细胞中一个基因的调控序列往往扩展达50kb之长，其中常间以不被调控蛋白所识别的空档区(spacer) 。 5.8.3.3　一个基因可以编码多个蛋白 　　在真核生物中，一个编码区包括多个内含子和外显子，一般情况下，在断裂基因初级转录本的剪接中，总是把所有的内含子剪掉，然后将外显子依次地连接起来。因此，一种断裂基因只能产生一种成熟的mRNA，合成一种多肽。但后来发现许多断裂基因在其转录本剪接中，通过不同的剪接方式从一个基因产生多种不同的多肽或蛋白质。生物体通过这种选择性剪接(alternative splicing)来调控基因的表达，产生不同的蛋白质以适应不同的环境需要。 小鼠淀粉酶在不同组织中mRNA的选择性剪接 　　真核基因中内含子的发现使中心法则的共线性原则发生动摇，上面我们也谈到通过RNA的选择性剪接从一个基因可以产生不同的蛋白产物，但这些都并没有改变基因(DNA)直接产物RNA的序列。1986年生物学家在锥虫(Trypanosome,一种人和昆虫的寄生虫)的线粒体内发现了一种能改变编码蛋白质RNA转录本的新的分子机制，这种机制叫RNA编辑（RNA editing）。这是在生成mRNA分子后，通过在选择的转录本区域内添加、去掉或置换核苷酸，从而改变来自DNA模板的遗传信息，翻译生成不同于模板DNA所规定的氨基酸序列。这过程是由叫编辑体(editosome)的酶复合体催化的。RNA编辑同基因的选择性剪接一样，使得一个基因序列有可能产生几种不同的蛋白质。 不同生物中的RNA编辑的情况 5.8.3.5　反义RNA 　　反义RNA(antisense RNA)(图7-20)是指与mRNA互补的RNA分子，它能与mRNA分子特异性地互补结合，从而抑制该mRNA的加工和翻译，是原核细胞中基因表达调控的一种方式。1984年Adelman等发现大鼠的促性腺激素释放激素(GnRH)的基因两条链都能转录，首次在真核中也发现了反义RNA。后来的许多实验证明在真核细胞中亦有不少反义RNA的存在。 antisense RNA 5.8.3.7翻译后的蛋白质修饰在基因表达调控中的作用 　　生物体内的某些成熟的蛋白质和直接从mRNA翻译出来的蛋白质的结构并不完全一样。例如某些蛋白质以前体形式合成，然后经蛋白酶水解成为长短不同的肽段，某些蛋白质则在翻译以后再进行某些氨基酸的修饰，如羟基化、磷酸化、乙酰化、糖基化等。其原因是多种多样的。例如密码子只有64种，只能编码20种氨基酸，而已知修饰过的氨基酸不下于100种，它们只能通过翻译后加工得到，而且它们又不是每一种蛋白质都必需的，因此通过翻译后加工比较更为经济合理。总之，生物在翻译后对蛋白质所起的某些修饰作用也是基因调控的一种方式，扩大了生物对环境的适应性。 * 5.8 基因表达的调控 5.8.1　 基因表达调控的多水平性 生物体的每个活细胞都含有相同的一整套基因。 基因表达具有高度的时空专一化：如肌红蛋白基因（肌细胞） 基因表达的调控：生物有机体对其基因表达的时空程序、表达速率等所进行的调节和控制。 本底水平表达：调控处于关闭状态，只翻译极少量的蛋白质 5.8.2　原核类基因的表达调控 一、操纵子与操纵